守护食品安全:新型电化学生物传感器助力食源性致病菌检测
食源性致病菌(如大肠杆菌O157:H7)可引发全球性流行病,导致严重的健康问题和经济损失。常规的检测方法(如培养法、免疫分析、表面增强拉曼散射和测序等)通常耗时长、操作复杂且需要昂贵的设备,难以满足快速现场检测的需求。因此,开发一种快速、灵敏且高效的检测方法显得尤为重要。近年来,电化学生物传感器因其操作简便、成本低廉和高灵敏度等优势受到广泛关注,结合等温扩增技术和新型材料(如共价有机框架COFs和磁性纳米材料Fe3O4)的应用,有望为食源性致病菌的检测提供一种新的解决方案。

近日,江西理工大学功能晶体材料化学江西省重点实验室张家林团队等在Sensorsand Actuators B: Chemical期刊上发表了题为 :Ultrasensitive electrochemical biosensor for bacteria detection based on Fe3O4@COF-AuNPs and trigging isothermal circular amplification论文。
研究者选用Fe3O4@COF-AuNPs作为核心材料。这种材料结合了Fe3O4的磁性、共价有机框架(COFs)的高比表面积和有序孔结构,以及金纳米颗粒(AuNPs)的催化特性,用于增强电化学信号。通过自组装的方式,将双链DNA(dsDNA)固定在电极表面,形成DNA单分子层。该DNA单分子层具有多个功能区域,用于结合目标细菌的适配体(HAP)。利用Klenow片段聚合酶(KF-Poly)触发等温循环扩增反应。当目标细菌(E. coli)存在时,其与适配体结合导致HAP的构象变化,从而启动TICA反应,使HAP从DNA单分子层脱离。Fe3O4@COF-AuNPs通过DNA互补配对固定在电极表面,对4-硝基苯酚(4-NP)的还原表现出高电催化活性,实现对目标细菌的超灵敏检测。
图1 采用功能化 Fe3O4@COF-AuNPs 和 TICA 构建细菌电化学传感器的示意图

图2 表征结果验证了Fe3O4@COF-AuNPs复合材料的成功合成及其结构特性,为后续的电化学检测提供了材料基础。

图3 传感器的检测过程验证。
使用荧光探针(TMARA)和AuNPs标记的DNA探针验证TICA反应。结果显示,E. coli存在时,TICA反应发生,荧光恢复,证明了TICA的可行性。
通过EIS监测电极表面的变化。结果显示,随着TICA反应的发生和Fe3O4@COF-AuNPs的固定,电极表面的阻抗值发生变化,表明传感器能够有效响应目标细菌的存在。
通过CV曲线的变化,进一步验证了传感器的检测过程。E. coli存在时,CV电流显著增加,表明TICA反应成功启动,且Fe3O4@COF-AuNPs能够有效催化4-硝基苯酚的还原反应。
在含有4-硝基苯酚的PBS溶液中,不同浓度的E. coli导致不同的CV电流响应,表明传感器具有良好的线性关系和低检测限。
通过电泳验证了TICA反应过程中DNA结构的变化。结果显示,只有在目标E. coli存在时,TICA反应才会发生,进一步证明了传感器的选择性。

图4展示了传感器对不同细菌的选择性测试结果。
分别检测了E. coli和其他六种干扰细菌(如铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等)以及混合样本。结果显示,只有E. coli能够引起显著的电流响应,而其他细菌几乎无响应,表明传感器具有高度的选择性。
总结:该研究开发的基于Fe3O4@COF-AuNPs和TICA的电化学生物传感器为食源性细菌的快速检测提供了一种新的、高效的技术手段。其高灵敏度、快速检测能力、良好的选择性和稳定性使其成为一种有潜力的检测工具,能够满足食品安全和公共卫生领域的实际需求。
参考文献:
[1] Zhang J, Zhou M, Yang L, et al. Ultrasensitive electrochemical biosensor for bacteria detection based on Fe3O4@ COF-AuNPs and trigging isothermal circular amplification[J]. Sensors and Actuators B: Chemical, 2025,422:136609.
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