“双环溶血”检测法：快速识别动物源耐药金黄色葡萄球菌的新利器

DZH试验：通过溶血表型“锁定”目标菌株

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌LA-MRSA中最常见的是CC398克隆复合体，2005年首见于猪和养猪从业者，后在畜牧业环境及接触者中扩散，其对甲氧西林、四环素等多种抗生素耐药，且养猪业密集地区医院的感染率更高，故需快速识别；而动物来源的金葡菌在血琼脂平板上常呈内侧β-溶血（完全溶血）、外侧大范围不完全溶血的“双区溶血”表型，人类来源菌株多无此特征。

为验证DZH试验的有效性，研究团队分析了371株金葡菌，涵盖CC398（183株，包括152株MRSA和31株甲氧西林敏感株MSSA）、CC1（44株MRSA）及其他克隆复合体（144株）。通过在羊血琼脂平板上37℃培养24小时，观察DZH表型，并结合PCR检测菌株的scn基因（人类适应标记）和hlb基因（编码溶血素，分完整或截短型），评估该试验的性能。

试验结果：DZH表型与动物来源高度关联

图 1 羊血琼脂上的生长表现

 经实验，164株菌株呈现DZH阳性表型，表现为内侧β-溶血（或缺失）加外侧大范围不完全溶血，在透射光下更清晰；37℃培养24小时与37℃培养24小时加4℃培养24小时这两种条件下的DZH晕环直径差异无统计学意义，因此推荐37℃培养24小时作为标准条件。

图 2 不同克隆系金黄色葡萄球菌的DZH表型与遗传特征分布图

 研究显示，不同菌株的DZH阳性表型出现比例差异显著：MRSA-CC398中94.7%呈阳性，MRSA-CC1中为25%，其他克隆复合体的MRSA中仅6.4%呈阳性，MSSA中仅9.7%的CC398菌株为阳性、其他谱系均为阴性；且所有DZH阳性菌株均携带完整hlb基因，99.4%缺失scn基因（动物来源金葡菌的典型标志），而207株DZH阴性菌株中99.5%携带scn基因（提示人类适应）、95.2%具有截短hlb基因。

性能卓越：敏感性与特异性双高

评估显示，DZH试验检测LA-MRSA表现优异：检测LA-MRSA-CC398的敏感性达94.7%、特异性90.9%；针对scn阴性的LA-MRSA（包括CC398和CC1）时，敏感性和特异性均超94%；而对所有scn阴性的金葡菌（具有动物来源特征），检测准确率更达99%以上。

研究亮点

精准响应临床检测需求：针对多重耐药的LA-MRSA（尤其CC398克隆复合体），提供简单可靠的检测方法，缓解其对公共卫生和临床治疗的压力。

表型与基因型高度匹配：DZH阳性对应动物来源金葡菌的完整hlb基因、缺失scn基因，阴性则关联人类适应菌株的截短hlb基因、携带scn基因，为快速判断菌株来源提供依据。

检测性能优异且适用清晰：检测LA-MRSA-CC398的敏感性94.7%、特异性90.9%；针对scn阴性LA-MRSA（含CC398、CC1），性能超94%；对scn阴性金葡菌（动物来源）准确率超99%，应用价值突出。

操作简便高效：仅需羊血琼脂平板37℃培养24小时，观察溶血表型即可完成检测，较其他方法更快出结果，适合临床实验室推广。

原文链接：https://doi.org/10.1128/spectrum.01102-24