仿生磁性病毒样纳米酶 LFA 技术问世,精准检测胃肠道病原体灵敏度提升超千倍
胃肠道感染性疾病作为仅次于呼吸道感染的第二大常见传染病,全球每年约有 10 亿病例,超 200 万人死亡,快速精准识别病原体对治疗和防控至关重要。然而,传统检测技术存在明显局限:细菌培养需 1-2 天,PCR 检测需 2-3 小时,且成本高(10-100 美元)、依赖大型仪器;常规侧向流免疫分析(LFA)虽操作简便,但灵敏度不足,难以检测早期感染中低浓度(10-100 CFU/mL)的病原体,且复杂样本(如粪便)易导致假阳性或假阴性。
此次研发的核心突破在于设计了一种仿生磁性病毒样纳米酶 Fe-Pt₂₀-Au@Pt₅。该纳米酶借鉴冠状病毒刺突蛋白结构,以 160nm 的 Fe₃O₄颗粒为核心,外层依次组装 20nm 海胆状铂纳米颗粒和 5nm 金铂卫星颗粒。其中,Fe₃O₄提供磁富集能力和类过氧化物酶活性,铂与金铂颗粒协同增强比色 / 催化活性,形成 “磁富集 - 协同增强 - 多催化位点” 的三重信号放大效应。 Transmission 电子显微镜(TEM)和 X 射线光电子能谱(XPS)表征显示,该纳米酶直径约 210nm,表面呈触手状结构,饱和磁化强度达 45.5 emu/g,可在 60 秒内实现磁分离,且在 pH 3-13、0-1000mM 氯化钠溶液中保持稳定催化活性。
图 1:呈现 Fe-Pt₂₀-Au@Pt₅纳米酶及其中间产物的 TEM 图、高分辨 TEM 图、EDS 元素分布、zeta 电位及磁性能数据,证实病毒样磁性纳米酶成功制备且磁分离效率高。
在检测性能上,Fe-Pt₂₀-Au@Pt₅-LFA 表现突出。通过磁富集目标菌、催化底物(如 AEC/H₂O₂)生成红色沉淀放大信号,其对三种病原体的检测限分别低至 4 CFU/mL(幽门螺杆菌)、5 CFU/mL(鼠伤寒沙门氏菌)和 9 CFU/mL(大肠杆菌 O157:H7),较传统金纳米颗粒 LFA 灵敏度提升 1111-2500 倍,且检测范围覆盖 10-10⁵ CFU/mL,相关系数均大于 0.965。同时,该技术实现 “一步检测”:样本与纳米酶孵育后经磁富集,滴加至试纸条 30 分钟内即可出结果,无需复杂前处理,成本仅为核酸检测的 1/5。
图 2:展示 Fe-Pt₂₀-Au@Pt₅纳米酶的 XPS 光谱、催化 TMB 的颜色与紫外吸收、稳定性曲线、动力学参数及自由能图,验证其高催化活性与稳定性。
临床验证进一步证实其可靠性。研究团队对 139 份临床粪便样本(含 71 份幽门螺杆菌阳性、12 份鼠伤寒沙门氏菌阳性、56 份阴性样本)进行检测,结果与实时荧光定量 PCR(qPCR)完全一致,灵敏度和特异性均达 100%。此外,在河水、湖水等环境样本中,目标菌回收率为 81.01%-116.85%,相对标准偏差小于 11.87%,证明其在复杂基质中仍能稳定工作。
图 3:包含病原体与纳米酶结合的 SEM 图、捕获效率数据、LFA 试纸条检测结果及 T 线 SEM 图,表明纳米酶捕获效率高且 LFA 检测特异性强。
图 4:呈现催化前后 LFA 检测不同浓度病原体的照片、信号强度、拟合曲线及传统 AuNP-LFA 结果,体现该 LFA 灵敏度高且优于传统方法。
该技术的问世,为胃肠道感染的现场快速诊断提供了新工具。其无需专业实验室和大型仪器,仅凭肉眼即可判读结果,尤其适合基层医疗机构、家庭自测及疫情暴发时的快速筛查,有望大幅缩短检测周期,助力病原体早发现、早防控,为公共卫生安全提供重要支撑。
参考文献:Wang B, Li J, Ai J, et al. Biomimetic Magnetic Virus-like Nanozyme-Mediated Lateral Flow Immunoassay for Direct and Accurate Detection of Gastrointestinal Pathogens[J]. Sensors and Actuators B: Chemical, 2025: 138654.
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