在微生物检测实验室中，标准菌株是进行培养基验证、方法确认和质控检查的“黄金标准”。其状态的纯净、活力的稳定以及清晰、可溯源的来源，共同构成了检测结果准确性与可靠性的基石。选择来源于权威机构（如中国CMCC、美国ATCC等）认可的标准菌株，是这一切的前提。这不仅能确保菌株的种属鉴定明确、遗传背景清晰、特性稳定可靠，更是实验室检测结果获得国际互认、满足CNAS、CMA、药典等法规符合性要求的关键。一旦管理失当或源头有误，不仅可能导致实验全线失败，更会引发错误的质量判定，其后果不堪设想。

规范化的标准菌株管理，是实验室质量保证体系的基石。本文将依据相关国家标准与行业实践，以标准操作程序的逻辑，为您详解从复苏、传代、保藏到销毁的全流程，助您构筑坚实的实验室质控防线。

第一步：复苏——唤醒沉睡的“标尺”

标准菌株的复苏，是确保其生物学特性完整复现的关键起点。

规范操作：

1. 准备工作：在生物安全柜内进行无菌操作。准备适宜的复苏培养基（如营养琼脂、TSA等）和培养设备。用75%酒精棉彻底擦拭冻干菌株西林瓶外壁。

2. 复溶液添加：按箭头方向打开塑盖，撕开铝盖，揭开胶塞。加入适量、适宜的复苏液（如脑心浸液培养基），轻柔振荡使冻干菌粉充分悬浮。

3. 接种与培养：使用无菌移液器吸取适量菌悬液，转移至非选择性固体培养基平板或液体培养基中。严格按照该菌株推荐的温度（如36℃±1℃）和时间（如24-48小时）进行培养。

风险点解析：

错误操作：在非无菌环境下操作；使用不适配的复苏液或培养基；复溶液添加量不准或振荡不充分。

潜在后果：引入杂菌污染；菌株复苏失败或生长不良；无法获得纯培养，导致后续实验数据全部失真。

第二步：传代——维持纯正“血脉”的延续

传代是为了维持菌株的活性，但必须严格限制次数，以防菌株发生变异。

规范操作：

1. 纯度检查：复苏后，必须检查菌落的形态、颜色等特征，并进行必要的生化鉴定，确保为纯培养。

2. 有限传代：所有标准培养物从标准储备菌株传代培养次数不得超过5次（依据GB/T 27405）。工作菌株不可替代标准菌株。

3. 规范继代：从标准储备菌株传代一次制备工作菌株，用于日常检测。每次传代需记录代次、日期和操作人员。

风险点解析：

错误操作：忽视纯度检查直接使用；无视代次限制，盲目多次传代；使用工作菌株作为标准菌株进行方法验证等关键实验。

潜在后果：使用污染菌株导致错误结果；菌株发生退化、变异，其生化特性、药敏谱改变，失去作为“标准”的意义，使质控形同虚设。

第三步：保藏——按下生命活动的“暂停键”

正确的保藏方法是长期维持菌株特性稳定的保障。

规范操作：

1. 选择方法：推荐使用深度冰冻（如-70℃及以下）或冻干法长期保存标准储备菌株。

2. 明确条件：根据菌种特性选择适宜的短期保存温度，如大多数细菌为2-8℃，部分霉菌、酵母为2-8℃，某些特殊菌株（如铜绿假单胞菌）可能需要25℃。并严格遵守推荐的转接频率（如每周、每半月或每月）。

3. 标识与记录：菌株容器上应有清晰、唯一的标识，包括菌种名称、编号、代次、保藏日期等。所有保藏信息均需详细记录。

风险点解析：

错误操作：保藏温度不适宜或不稳定；反复冻融同一支储备菌株；保藏容器密封不严导致脱水或污染；标识不清或记录缺失。

潜在后果：菌株活性迅速下降甚至死亡；菌株特性发生改变；无法追溯菌株来源和历史，影响实验结果的可比性与可追溯性。

第四步：销毁——筑牢生物安全的“终点站”

实验结束或菌株超过使用代次后，必须进行安全彻底的销毁。

规范操作：

1. 无害化处理：所有含菌的实验材料（如斜面、平板、菌悬液、移液器吸头等）均应置于121℃下高压蒸汽灭菌至少30分钟。

2. 规范废弃：经灭菌后的废物，应按照实验室废弃物处理程序，置于特殊标识的垃圾袋中，交由专业机构处理或按规弃置。

3. 记录归档：销毁操作需进行记录，包括销毁日期、菌株信息、销毁方法及操作人，实现全程闭环管理。

风险点解析：

错误操作：将含菌物料直接丢弃入普通垃圾桶；高压灭菌温度或时间不足；销毁记录缺失。

潜在后果：导致致病微生物泄漏，引发实验室感染或环境污染事件；违反生物安全法规，承担法律风险。

迈向卓越质控：环凯定量标准菌株的解决方案

面对标准菌株管理全流程中的诸多挑战，选择一款高品质、即用型的标准菌株产品，能从根本上提升工作效率与数据可靠性。

环凯微生物推出的定量标准菌株，严格遵循质量管理体系生产：

A. 即开即用：产品为冻干形式，预分装于西林瓶中，附带专用复苏液，省去繁琐的活化与标定步骤，减少操作误差。

B. 量值准确：每支菌株均经过定量验证，活菌数稳定可控，确保在培养基验收、方法验证等实验中结果的准确性与重复性。

C. 溯源清晰：菌株来源清晰，可追溯至国家标准菌种保藏中心，为实验室检测结果的有效性与可比性提供有力支撑。

D. 配套完善：提供详细的使用说明书，包含复苏、培养、保存等完整信息，并符合GB 4789、中国药典等相关标准要求。

 

环凯定量标准菌株，是您进行实验室内部质量控制、实现精准检测的可靠伙伴。

结语

标准菌株的管理，是一门严谨的科学，也是一项需要持之以恒的精细工作。建立并严格执行从“复苏”到“销毁”的标准化程序，不仅是满足CNAS、CMA、GMP等认证认可要求的必要条件，更是每一个追求数据精准、结果可靠的实验室的责任与担当。