多模态生物传感器问世!精准检测食源性致病菌,检测限低至 0.97 CFU/mL
副溶血性弧菌是全球范围内高发的食源性致病菌,常存在于海鲜等水产品中,人体感染后会出现恶心、呕吐、发热等症状,严重时可引发休克甚至死亡。传统检测方法如培养法、酶联免疫吸附试验(ELISA)等存在操作复杂、耗时久、成本高的弊端,难以满足现场快速检测需求。而现有单一模态传感器易受复杂样品干扰,检测准确性不足,开发高灵敏度、高稳定性的新型检测技术成为行业迫切需求。
研究团队创新性地构建了 MCOF-Apt@Ag 复合体系,为多模态检测奠定核心基础。磁共价有机框架(MCOF)通过溶剂热法合成,将铁纳米颗粒与共价有机框架(COF)结合形成核壳结构,既保留了铁纳米颗粒的磁分离特性,又借助 COF 的多孔结构避免银纳米颗粒团聚,还能屏蔽铁纳米颗粒的催化活性以降低背景干扰。适配体修饰的银纳米酶(Ag@Apt)则通过银 - 硫键实现精准组装,兼具优异的过氧化物酶活性和对副溶血性弧菌的特异性识别能力。
该传感器的检测机制巧妙且高效:在检测体系中,MCOF 与 Ag@Apt 通过静电作用自组装形成稳定复合物,其过氧化物酶活性可催化聚集诱导发光分子(TPE-4A)氧化生成绿色产物 TPE-4A²⁺。当存在副溶血性弧菌时,Ag@Apt 会优先通过碱基配对等作用与细菌结合,抑制 MCOF-Apt@Ag 复合物的形成。经磁分离后,沉淀物中复合物减少导致催化活性减弱,使体系颜色从深绿变为浅绿,600 nm 处紫外吸收强度降低,同时 500 nm 处荧光强度升高,实现比色与荧光双重检测。此外,上清液中未结合的 Ag@Apt 可作为 SERS 基底,与信号分子 4 - 巯基苯甲酸(4-MBA)作用,随着细菌浓度升高,SERS 信号逐渐增强,形成第三重检测维度。
图1:Fe NPs 与 MCOF 的 TEM 图、FT-IR 光谱,证实 MCOF 合成成功。
实验数据显示,该多模态传感器性能卓越。比色、荧光、SERS 三种模式的检测限分别低至 1.50 CFU/mL、1.02 CFU/mL 和 0.97 CFU/mL,在 1.5×10¹ 至 1.5×10⁸ CFU/mL 浓度范围内均呈现良好线性关系,相关系数(R²)最高达 0.9996。在选择性测试中,该传感器对副溶血性弧菌表现出特异性识别能力,即使在李斯特菌、金黄色葡萄球菌等杂菌及葡萄糖、氨基酸等常见干扰物质存在时,仍能准确检测目标致病菌。
图2:MCOF-Apt@Ag 的 TEM 图、XPS 谱,验证复合物组装及化学组成。
在实际样品验证中,研究团队将传感器应用于虾和三文鱼样品的检测,三种模式的回收率介于 97% 至 112% 之间,相对标准偏差(RSD)均小于 3.66%,检测结果与标准平板计数法无显著差异。此外,该传感器在 20 天内保持稳定的酶活性,且对肠道益生菌的抑制率低于 15%,具备良好的稳定性和生物相容性,为食品检测场景的实际应用提供了安全保障。
图3:副溶血性弧菌的三种光谱及浓度 - 信号线性关系(R² 最高 0.9996)。
该研究负责人表示,多模态检测模式的优势在于通过三重信号交叉验证,大幅提升了检测的准确性和抗干扰能力,同时满足不同场景需求 —— 比色模式可实现肉眼快速定性,荧光和 SERS 模式适用于精准定量。配合手持 SERS 光谱仪与智能手机联网,该传感器有望实现食源性致病菌的现场快速定量检测,广泛应用于水产品加工、餐饮行业卫生监管、市场质量抽检等领域。
未来,研究团队将进一步优化传感器的 pH 适用范围,通过更换特异性适配体,拓展其对沙门氏菌、大肠杆菌等其他食源性致病菌的检测能力,推动该技术向低成本、自动化、便携化方向发展,为食品安全防控体系提供更强大的技术支撑。
参考文献:Xiao J, Li T, Sun J, et al. Target-inhibited MCOF-Apt@ Ag self-assembly for multi-modal biosensor for detecting Vibrio parahaemolyticus[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2025: 118248.
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