超灵敏快检!我国团队研发尿路细菌检测新平台

原创
来源:徐礼龙
2026-04-02 16:24:40
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核心提示:我国团队研发ME‑CRISPR 一体化检测平台,将磁富集、光热裂解与双 CRISPR 检测结合,40 分钟即可超灵敏检出尿液中大肠杆菌和粪肠球菌,检测限低至 10 CFU/mL,临床验证灵敏度与特异性均 100%,无需复杂前处理与温控设备,可快速指导精准用药,遏制抗生素滥用。

尿路感染(UTIs)是全球高发感染性疾病,每年超 1.5 亿人患病,而传统检测耗时长、操作繁琐,易导致抗生素滥用与耐药菌扩散。传统尿路感染检测依赖细菌培养,耗时 18–30 小时,且易受抗生素治疗干扰;PCR 等分子方法需精密温控设备,尿液中的结晶、抑制剂还会干扰结果。针对这些痛点,团队创新性融合等离子体磁纳米颗粒与双通路 CRISPR 检测技术,实现从样本前处理到结果判读的全流程简化。

该平台核心为4‑巯基苯硼酸修饰的等离子体磁纳米颗粒(PMNPs‑MPBA)。其表面硼酸基团可广谱结合细菌细胞壁顺式二醇结构,10 分钟内完成革兰氏阴性 / 阳性菌高效捕获;在外磁场作用下快速富集,无需离心,避免尿液结晶干扰。近红外激光照射时,纳米颗粒通过局域表面等离子体共振效应产生局部高温,5 分钟内原位裂解细菌,无需溶菌酶等化学试剂,适配所有细菌类型,彻底解决革兰氏阳性菌难裂解的难题。

1:表征 PMNPs 的结构、形貌与性能,确认材料制备成功

细菌裂解释放的核酸直接进入单管双通路 RPA‑CRISPR/Cas12a‑Cas13a 检测系统:以大肠杆菌 endA 基因、粪肠球菌 sodA 基因为靶标,通过重组酶聚合酶扩增(RPA)恒温放大信号,再经正交 Cas 酶精准识别 ——Cas12a 靶向检测大肠杆菌 DNACas13a 靶向检测粪肠球菌 RNA,双通道荧光信号互不干扰,单管实现两种致病菌同步判读,全程仅需 25 分钟。

2:验证 PMNPs‑MPBA 可高效广谱捕获尿路致病菌

性能验证显示,ME‑CRISPR 平台检测限低至 10 CFU/mL,远超临床诊断阈值;对 90 例临床样本(39 例大肠杆菌阳性、26 例粪肠球菌阳性、25 例阴性)检测,灵敏度与特异性均达 100%,与 qPCR 结果完全一致,而检测时间从 135 分钟缩短至 40 分钟,效率提升 70%。同时,平台对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等常见病原体无交叉反应,抗干扰能力强,在血尿、蛋白尿等复杂尿液样本中仍稳定工作。

3:证实 PMNPs 光热性能优异,磁富集可实现细菌快速光热裂解

该技术突破三大瓶颈:免离心富集解决样本前处理干扰、光热广谱裂解突破菌种壁垒、单管双 CRISPR实现快速多重检测。整套流程无需专业人员与大型设备,适配床旁即时检测(POCT),可快速明确致病菌,指导精准用药,遏制抗生素滥用与耐药菌传播。

研究团队表示,未来将进一步集成微流控技术,拓展检测靶点覆盖更多尿路致病菌,推动平台小型化、自动化,早日应用于临床与社区场景,为尿路感染精准防控提供高效工具,助力应对全球抗生素耐药挑战。

参考文献:Tu Z, Wang Y, Qian X, et al. Plasmonic magnetic nanoparticles-enabled universal enrichment, photothermal lysis, and duplex CRISPR detection of bacteria in urine samples[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2026: 118518.

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