GB 4789.9-2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验》正式实施后，食品微生物实验室进入了空肠弯曲菌和结肠弯曲菌“双菌检测”的新阶段。与 2014 版相比，新标准不仅扩大了检测对象，也对样品处理、增菌分离、鉴定确认和结果报告提出了新的操作要求。

从实施三个多月后的实验室落地情况看，新标准带来的挑战并不只是“是否理解方法变化”，而是如何把每个关键环节稳定、规范、可重复地执行出来。对于空肠弯曲菌和结肠弯曲菌这类对微需氧环境和选择性培养体系高度敏感的目标菌而言，培养基质量和流程稳定性，正在成为影响检测结果的重要基础。

一、新旧标准变化：检测流程发生系统调整

GB 4789.9-2025 相较于 2014 版的变化，可以集中概括为四个方面。

首先，检测对象由单一空肠弯曲菌扩展为空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。2014 版标准主要适用于食品中空肠弯曲菌的检验；2025 版则将结肠弯曲菌纳入检测范围，使食品中弯曲菌污染风险识别更加完整。

其次，样品前处理更强调目标菌富集。新版标准中，多数样品需经 0.1%蛋白胨水处理、过滤、低温高速离心和沉淀重悬后，再进入弯曲菌增菌液。这一流程有助于提高低水平污染样品中目标菌进入检测体系的机会，也减少复杂样品基质和背景菌对后续分离培养的影响。

再次，分离培养方式发生明显变化。2014 版主要采用 Bolton 肉汤增菌后划线接种 Skirrow 血琼脂、mCCDA 琼脂或显色培养基；2025 版则采用弯曲菌增菌液培养后，通过 0.45 μm 滤膜转移至哥伦比亚血琼脂和卡玛丽血琼脂平板进行分离。滤膜是否贴合、液体是否充分透过滤膜、平板表面状态是否适宜，都会影响可疑菌落的获得和判断。

最后，鉴定确认路径更加清晰。新版标准规定，对于弯曲菌属可疑菌落，可通过生化试验，或者实时荧光 PCR，或者 MALDI-TOF MS 方法进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌鉴定。也就是说，这些方法均属于标准给出的鉴定确认路径，实验室可结合平台条件选择使用；但其适用前提仍是获得符合要求的可疑菌落或纯培养物，并不能替代前端增菌和分离培养环节。

GB 4789.9-2025 版实验流程

由此可见，GB 4789.9-2025 的更新并不是单一技术替换，而是围绕“双菌覆盖、前处理富集、滤膜分离、鉴定确认”形成了更完整的检测流程。这也使实验室对培养基质量、操作一致性和流程衔接提出了更高要求。

二、新标落地的核心难点：变量更多，容错更低

弯曲菌检测本身并不是一个“粗放型”项目。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对氧浓度、培养温度、营养条件和选择性抑菌体系较为敏感；样品背景菌复杂时，目标菌恢复和分离更容易受到干扰。新标准实施后，实验室需要同时控制前处理富集、选择性增菌、滤膜分离、血琼脂培养、菌落挑取和后续鉴定等多个环节。

这些变化使一个问题更加突出：实验室不能只关注“方法是否会做”，更要关注“每一批是否做得一致”。如果培养基配制、平板质量、抗生素添加、血液成分、微需氧条件或滤膜操作存在波动，就可能影响可疑菌落的生长状态和最终判定结果。

因此，GB 4789.9-2025 落地后的真正挑战，是如何减少人为变量，提高流程稳定性。

三、预制培养基：减少变量，让实验员聚焦检测本身

在弯曲菌检测中，培养基不是普通耗材，而是影响目标菌恢复、生长、分离和后续鉴定的核心条件。尤其在 GB 4789.9-2025 中，0.1%蛋白胨水、弯曲菌增菌液、哥伦比亚血琼脂和卡玛丽血琼脂均处于关键环节，其稳定性直接关系到检测流程能否顺利推进。

如果实验室自行配制培养基，需要经历称量、溶解、pH 调节、灭菌、冷却、加血、加抗生素、分装、倾注、保存等多个步骤。对于常规致病菌检测而言，部分细小偏差可能影响有限；但对于弯曲菌这类培养要求较高的目标菌，成分比例、抗生素添加、血液质量、平板干湿状态和保存条件的变化，都可能影响目标菌恢复和分离效果。

采用即用型预制培养基或标准化配套培养基，可以减少培养基制备过程中的人为变量，提高不同批次、不同人员和不同实验室之间的操作一致性。实验人员无需把大量精力用于培养基制备和批次差异排查，而是可以更专注于样品处理、微需氧培养控制、可疑菌落识别和结果审核。

需要明确的是，预制培养基本身不能替代微需氧培养装置，也不能直接解决气体比例控制问题。微需氧环境仍需依靠规范的微需氧培养系统实现。但预制培养基能够有效降低培养基成分、平板状态和制备过程带来的不确定性，与稳定的微需氧环境共同构成弯曲菌检测成功的基础。

四、从前处理到确认的流程化支持

针对 GB 4789.9-2025 的检测流程，环凯相关产品可从样品前处理、选择性增菌、分离培养到分子确认提供流程化支持。

1. 样品前处理：为目标菌富集打好基础

环凯 0.1%蛋白胨水可用于样品悬浮、洗脱和前处理，为后续离心富集和增菌培养打好基础。

C28025D4 0.1%蛋白胨水 100mL×10袋

2. 选择性增菌：帮助目标菌恢复与扩增

空肠弯曲菌和结肠弯曲菌在食品样品中可能处于低污染水平或受损状态，增菌体系的稳定性直接影响后续分离培养结果。环凯弯曲菌增菌液基础及配套试剂可对应新版标准中的选择性增菌需求，有助于目标菌从复杂样品背景中恢复和扩增，提高后续分离成功率。

027386 弯曲菌增菌液基础 250g/瓶

3. 分离培养：降低自配平板带来的波动

环凯哥伦比亚琼脂培养基和 Karmali 琼脂平板可服务于可疑菌落分离、纯培养及后续鉴定前培养需求，帮助实验室降低自配平板带来的批间差异和操作波动。

024061 哥伦比亚琼脂培养基 250g/瓶

C24061B5 Karmali琼脂平板(空肠弯曲菌分离培养) 90mm×20个

4. 分子确认：提升可疑菌落鉴定效率

新版标准将实时荧光 PCR 列为可疑菌落鉴定确认路径之一。对于具备 PCR 平台的实验室，环凯空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重核酸检测试剂盒可为标准流程中可疑菌落的分子确认提供工具；如用于企业内部自控或快速筛查场景，则应结合产品说明书和实验室方法验证开展，不宜直接替代标准培养分离后的结果报告。

FZ030BF2 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48test

GB 4789.9-2025 的实施，使空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检测对样品富集、分离培养和鉴定确认提出了更高要求。对于实验室而言，新标落地的关键不只是“按标准操作”，更是减少人为变量、提升流程稳定性。环凯围绕前处理、增菌、分离培养和分子确认提供配套产品支持，帮助实验室更高效、更稳定地完成空弯/结弯检测。