鲁米诺功能化AuNF标记核酸适体检测单核细胞增生李斯特菌

  目前，食品安全已受到世界各国的广泛关注。食源性疾病已成为人类健康的主要威胁，其中单核细胞增多性李斯特菌(LM)是世界范围内污染食品的主要食源性病原体之一。LM可以污染各种食物，尤其是富含淀粉和蛋白质的食物，如肉类和肉制品、家禽和蛋制品、牛奶和其他乳制品。LM具有很强的生命力，可以在0 - 45℃下生存。它在冰箱的温度下仍然可以生长，这也是它不同于其他食源性病原体的一个重要特征。LM可导致人和动物败血症、脑膜炎和单核细胞增多症，对免疫力差的婴儿和老年人的健康构成巨大威胁。尽管食品中存在LM有规定，但它非常普遍，并定期使用微生物分析对食品中的LM进行监测。因此，建立一种快速准确的LM检测方法是非常重要的。

  鲁米诺(Luminol)是化学发光(CL)反应体系中常用的化学发光试剂，发光效率好。鲁米诺和H2O2的反应，已被广泛开发用于检测多种物质。利用磁性纳米材料的超顺磁性对目标物质进行分离、富集、纯化，有效缩短了富集时间，消除了样品基质对检测灵敏度的影响，并大大提高了检测效率。

  化学发光原理：在一定条件下，鲁米诺能被H2O2氧化成luminol-ox，当它跃迁到激发态时发生瞬态发光。在CL体系中加入H2O2和Co2+后，体系强度明显增强。

  图1 检测示意图。

  检测优点：(1)缩短了测试时间。该适配体易于合成，大大降低了检测过程的成本和时间。通过在磁性纳米材料上标记核酸适配体，可有效快速富集食品样品中的病原体，为病原体的直接检测提供了一种特异的检测工具。(2)检测范围广，检出限低。在1×101 ~ 1×105 CFU·mL−1浓度范围内，CL浓度变化与细菌浓度的对数呈良好的线性关系，检出限为6 CFU·mL−1。(3)特异性高。交叉反应试验表明，该方法对LM有足够的特异性。 (4)食品样品的适用性。将该方法应用于牛奶样品，回收率为91% ~ 110%，RSD值均低于5.9%。

  参考文献：Chen W, Cui L, Song Y, Chen W, Su Y, Chang W, Xu W. Detection of Listeria monocytogenes Using Luminol-Functionalized AuNF-Labeled Aptamer Recognition and Magnetic Separation. ACS Omega. 2021 Sep 27;6(40):26338-26344.