一种新的化学单基因方法快速检测乳制品中的李斯特菌

  单增李斯特菌是引起食源性疾病的重要病原菌之一，在我国，由单增李斯特菌导致的疾病频发。因此，快速灵敏检测食品中的单增李斯特菌是十分重要的。本文介绍了将样品制备方法基质裂解法与基于化学发光的检测平台(AquaSpark)相结合检测食品中单核细胞增多性李斯特菌的原理验证。以qPCR作为金标准，对所提出的方法进行了评估，以可靠地检测初次富集后的单核细胞增多性李斯特菌。

  什么是单增李斯特菌?

  单核细胞增多性李斯特菌是一种兼性厌氧病原菌，具有较强的生长适应性。最适生长温度为30～37℃，但单核细胞增多性李斯特菌在4℃时仍能缓慢生长繁殖。即使是冰箱里保鲜的食物，如蔬菜、果汁和鲜肉，也有被污染的风险。单核细胞增多症主要影响老年人、孕妇、新生儿和免疫力较弱的人，死亡率很高(约20%至50%)。人类感染单核细胞增多性李斯特菌可导致严重的全身感染，症状包括败血症、脑膜炎和流产。因此，建立一种快速、灵敏、准确的单核细胞增多性李斯特菌筛选方法，对减少感染、保证食品安全具有重要意义。

  怎么检测单增李斯特菌？

  聚合酶链反应(PCR)和实时PCR是应用最广泛的方法之一，但通常需要耗时的DNA纯化步骤，特别是为了实现低检测限，较为费时费力。

  在本文中，作者介绍了将样品制备方法基质裂解法与基于化学发光的检测平台(AquaSparkTM)相结合检测食品中单核细胞增多性李斯特菌的原理验证。以qPCR作为金标准，对所提出的方法进行了评估，以可靠地检测初次富集后的单核细胞增多性李斯特菌。对于细菌输入>1 CFU/ml，AqS方法对两种食品都有100%的相对特异性，对牛奶和酸奶的相对灵敏度分别为100%和96%。只有在非常低的初始细菌浓度(<1 CFU/ml)下，发现AqS和qPCR之间的差异结果突出了两种方法的优势和局限性。

  图 1 检测示意图

  结论：本文介绍的新方法具有被食品行业用于病原体检测以监测食品质量的潜力，因为它不仅节省了时间和成本，而且更容易处理，所需样品量较小，并且适合在工厂环境中集成现场检测。作为下一步，必须对开发的方法进行积极评估，使用自然污染的样本，以提高其在常规条件下的适用性。

  参考文献：Bromberger B, Mester PJ. Rapid detection of Listeria monocytogenes in dairy products by a novel chemilumonogenic approach. Food Microbiol. 2023 Feb;109:104150. doi: 10.1016/j.fm.2022.104150. Epub 2022 Sep 21. PMID: 36309452.