在食品安全领域，微生物检验标准的更新对于保障公众健康和规范食品行业至关重要。2025 年 3 月 27 日，GB 4789.38-2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》正式发布，这一新标准历经数年修订，相较于 2012 版有了诸多重要变化，为食品中大肠埃希氏菌的检测提供了更科学、更精准、更便捷的方法。

一、标准范围的明确化

2025 版标准对适用范围进行了更为细致的划分，明确了第一法、第二法的适用范围。

二、术语和定义的精简

三、设备和材料的优化

在设备方面，2025 版标准增加了 48℃±2℃恒温装置的要求，同时，对冰箱的设备参数也进行了微调，此外，增加了易耗品无菌试管、接种环、吸管及均质袋和均质杯的材料要求，并删除了菌落计数器、紫外灯等设备的要求。

四、培养基和试剂的更新

2025 版标准在培养基和试剂方面进行了较大幅度的修改。删除了蛋白胨水、缓冲葡萄糖蛋白胨水（甲基红和 V-P 试验用）、西蒙氏柠檬酸盐培养基、伊红美蓝（EMB）琼脂、营养琼脂斜面、结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）、结晶紫中性红胆盐 - 4 - 甲基伞形酮 - β - D - 葡萄糖苷琼脂（VRBA-MUG）、革兰氏染色液、Kovacs 靛基质试剂等培养基和试剂。这些被删除的培养基和试剂在 2012 版标准中用于大肠埃希氏菌的分离、培养、鉴定等环节。而新标准引入了胰蛋白胨胆盐 X - 葡萄糖醛酸苷（Tryptone Bile X - glucuronide，TBX）琼脂，这是基于现行国际标准 ISO 16649 - 2:2001 及 ISO 16649 - 3:2015 的应用实践。 

 五、检验程序和操作步骤的简化与优化

（1）第一法检验程序和操作步骤

2025 版标准对第一法的检验程序进行了简化，删除了 2012 版中伊红美蓝平板分离培养、营养琼脂斜面或平板培养、随后进行的靛基质试验、MR - VP 试验和柠檬酸盐利用试验等一系列繁琐的步骤。而新标准直接采用 TBX 琼脂平板进行验证实验，同时，检验程序中“接种 EC 肉汤”后的培养时间也由原来的“48h±2h”修改为“24 ~ 48h”。

在操作步骤方面，2025 版样品稀释环节增加了“生理盐水”作为稀释液的选择。同时，删除了样品稀释过程中换用 1mL 无菌吸管反复吹打的操作描述。此外，还修改并增加了液态样品制备的操作部分。初发酵、复发酵试验过程虽然变化不大，但也进行了一些细微的调整，另外，确认实验直接使用 TBX 琼脂进行。

（2）第二法操作步骤

a. 2025 版标准对第二法中操作步骤的部分描述也进行了修改。对培养基及操作步骤的描述进行了调整更新。

 b.新增了大肠埃希氏菌菌落数的计算。

 六、结果报告的细化

2025 版标准在结果报告方面进行了细化和完善。在 2012 版标准的基础上，针对菌落生长大于和小于100的情况分别给出了详细的要求描述。

2025版

面对GB 4789.38 - 2025带来的这些深刻变化，检测机构的技术能力和专业素养面临着严峻的考验。广东省微生物分析检测中心，作为国内领先的食品检测机构，始终致力于提供专业及精准的检测服务。我们不仅紧跟国家最新标准，如 GB 4789.38 - 2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》，更是积极参与标准的比对和验证工作，确保我们的检测方法始终处于行业前沿。 

参考资料：

  1. GB 4789.38-2025《食品安全国家标准　食品微生物学检验　大肠埃希氏菌计数》：https://www.mbiosh.com/standard-regulations/list/32991

2. GB 4789.38-2025《食品安全国家标准　食品微生物学检验　大肠埃希氏菌计数》解读材料（网易发布）

3. GB 4789.38-2025《食品安全国家标准　食品微生物学检验　大肠埃希氏菌计数》（标准信息网发布）