1、培养基在灭菌前，需进行加热溶解(含琼脂的培养基需煮沸4-6次至琼脂完全溶解)，再进行分装灭菌(应不超过1000mL);

  2、含琼脂培养基，若灭菌前未进行加热溶解，灭菌后需充分摇匀使用;

  3、所有培养基不宜灭菌过度和长时间保温，特别是含糖量高的培养基，如沙氏葡萄糖琼脂，灭菌过度或保温时间过长易使葡萄糖发生焦化，灭菌后的培养基颜色会变深，pH会下降，此外还会使蛋白胨中的维生素分解，降低培养基的营养;

  4、需另加添加剂的培养基通常在培养基冷却至50℃左右时加入，已加入添加剂的琼脂类培养基不可熔化再次使用;

  5、配制好的培养基需及时灭菌，不可久置;

  6、培养基不可重复灭菌;

  7、琼脂培养基不可反复熔化使用;待用的琼脂培养基可置47-50℃水浴保温或50-60℃烘箱保温，一般不可超过4小时;

  8、使用蒸馏水或纯化水配制。饮用水或自来水中由于含矿物盐离子，配制培养基会产生浑浊现象;

  9、容器不易过满，容量至少应比培养基体积大20%。