三种弧菌噬菌体的分离、表征和控制溶藻弧菌的初步应用

溶藻弧菌可感染鱼类、贝类和其他水生生物，也是人类和水生动物的常见病原体。目前，溶藻弧菌的抗生素耐药性问题日益严重，弧菌噬菌体可以替代抗生素治疗弧菌感染。

溶藻弧菌广泛分布于海洋和河口水域，通过伤口和海水浸泡可导致感染，感染后可引起伤口感染和腹膜炎，还可能导致免疫力低下的人出现中耳炎。溶藻弧菌还可感染海洋生物，如鱼类、甲壳类动物和软体动物，并可导致受感染动物死亡。黄鱼（Pseudosciaena crocea）是中国南方最重要的养殖海洋鱼类之一，很容易被溶藻弧菌感染。养鱼场主要通过在饲料中添加抗生素或其他化学物质来预防或治疗溶藻弧菌感染。然而，抗生素的广泛使用和滥用导致了单药和多药耐药菌株的广泛出现。而耐药菌可以通过直接接触或食源性途径感染人类，对人类健康构成威胁。噬菌体是一种可以感染和裂解宿主细菌细胞的病毒。与单独使用噬菌体相比，噬菌体鸡尾酒疗法可以扩大噬菌体制剂靶向宿主细菌的范围，延缓噬菌体抗性菌株的出现，提高治疗效果。在这项研究中，分离了三种新型弧菌噬菌体并进行了生物学表征，并构建了一种噬菌体混合物来控制食物中的溶藻弧菌。

三种噬菌体的斑块均呈透明圆形。XZ1和XZA被归类为Straboviridae，XZB被归类为Caudoviricetes。

噬菌体XZ1、XZA、XZB和噬菌体混合物的最佳MOI分别为1、0.1、0.1和0.01。XZ1的潜伏期约为30 min，爆发量约为252 PFU/cell。XZA的潜伏期约为10 min，爆发大小约为233 PFU/cell。XZB的潜伏期约为40 min，爆发量约为570 PFU/cell。

17株菌株中，XZ1和XZB仅感染溶藻弧菌GS_MYPK1，未裂解其他菌种或菌株。然而，除了溶藻弧菌 GS_MYPK1 外，XZA 还可以感染副溶血性弧菌 ATCC 17802。

3种噬菌体的滴度随着温度的升高而降低。在80 °C孵育1 h后，与初始滴度相比，三种噬菌体滴度均下降了99%以上。噬菌体 XZA 和 XZB 在 pH 值为 4-10 的范围内表现出可观察到的稳定性。然而，XZ1对pH值变化更敏感。在紫外线照射下，3种噬菌体的活性逐渐减弱，12 min后，XZ1、XZA和XZB滴度与初始滴度相比，均下降了99%以上。噬菌体对盐度的耐受性在10 g/L盐度时略有下降。

无论是单独使用噬菌体XZ1、XZA、XZB，还是使用其噬菌体混合物，均能对溶藻弧菌的生物膜起到很好的防控作用。噬菌体对溶藻弧菌生物膜的破坏作用则未表现出一致的减少或增加趋势。

无论是单一噬菌体还是噬菌体混合物制剂，都可以减少鱼肉表面的溶藻弧菌。

文章结论：在这项研究中分离的三种噬菌体XZ1、XZA、XZB，无论是单独使用还是作为鸡尾酒制剂使用，均能防止溶藻弧菌生物膜的形成，且鸡尾酒制剂的效果优于单一噬菌体。冷藏温度（4 ℃）下，XZ1组2 h、XZB组和噬菌体混合物组4 h，可降低溶藻弧菌活菌数。

参考文献：doi 10.1016/j.lwt.2023.115638