“一苗双防”：M2e嵌合诺达病毒样颗粒疫苗在白来航鸡中实现H9N2/H5N2跨亚型清除与病理保护

背景知识

禽流感A型病毒（IAV）中的H9N2和H5N2亚型是家禽中广泛传播、造成重大经济损失的病原体。它们不仅导致鸡群生长迟缓、产蛋量下降，还具备跨物种传播潜力，存在公共卫生风险。目前疫苗主要基于血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）蛋白，但由于这两种蛋白易发生抗原漂移和抗原转换，传统疫苗难以提供广谱保护。

M2蛋白的胞外区（M2e）在不同亚型间高度保守，是开发广谱流感疫苗的理想靶点，但其天然免疫原性较弱。为此，研究人员将人和禽类M2e表位融合至罗氏沼虾诺达病毒衣壳蛋白（NvC）上，构建出可自组装的病毒样颗粒（VLPs），以期增强免疫原性并提供交叉保护。

嵌合VLP疫苗免疫与H9N2/H5N2攻毒试验流程图——白来航SPF鸡免疫程序、采样时点及评估指标图 

研究方法

1、疫苗构建与表达

构建重组质粒表达NvC-2xhuM2e-2xavM2e融合蛋白。在大肠杆菌中表达并纯化。通过透射电镜（TEM）和动态光散射（DLS）确认VLPs形成。

2、动物实验设计

使用SPF白来航鸡，分为三组：PBS对照组、VLP组、VLP+CpG佐剂组。三次免疫（间隔两周），两周后攻毒（H9N2或H5N2）。检测抗体水平、体重变化、临床症状、病毒载量、排毒情况、肺部与气管病理变化、细胞因子水平等。

研究结果

1、免疫原性

VLP疫苗诱导出高水平的M2e特异性IgY抗体，能交叉识别H9N2和H5N2的M2e。加CpG佐剂组抗体水平更高。

2、临床保护效果

VLP免疫组鸡只在攻毒后未出现体重下降，症状轻微，恢复快.对照组鸡只体重下降明显，症状持续至第12天。

3、病毒载量与排毒

免疫组鸡只肺组织中病毒RNA显著减少。加CpG组在H5N2攻毒后肺组织中未检测到病毒RNA。免疫组鸡只口咽和泄殖腔排毒显著减少，部分时间点病毒RNA完全检测不到。

4、组织病理学

免疫组鸡只肺部和气管炎症明显减轻，表现为轻度间质性炎症、水肿、支气管周围炎。对照组则出现中度至重度炎症、上皮变性、杯状细胞增生和纤毛脱落。

5、细胞因子反应

免疫组鸡只感染后IFN-γ、IL-12和IL-10水平显著升高。表明疫苗激活了Th1型免疫反应并调控炎症反应，减少免疫病理损伤。

结论

本研究构建的NvC-2xhuM2e-2xavM2e病毒样颗粒疫苗在白来航鸡中诱导了广谱的M2e特异性抗体，显著减轻了H9N2和H5N2攻毒后的临床症状、病毒载量、排毒水平及组织损伤。疫苗通过激活Th1型免疫反应和调控炎症因子（如IL-10）实现病毒清除与免疫保护，具有良好的交叉保护潜力。

意义

本研究首次在鸡模型中验证了基于NvC VLPs展示M2e的疫苗对H9N2和H5N2的交叉保护效果，并提供了M2e作为广谱禽流感疫苗靶点在禽类中的实证支持。该疫苗平台具备生产简便、稳定性高、免疫原性强等优点，有望作为广谱、通用型禽流感疫苗候选，用于家禽免疫防控，减少经济损失与公共卫生风险。为未来应对多亚型流感病毒提供新的疫苗策略。

参考来源：

Thian, B.Y.Z., Fatimah, M.N.N., Omar, A.R., Hussin, H., Ong, H.K., Wong, C.L., Mariatulqabtiah, A.R., Ho, K.L., Tan, W.S., Virus-like particles of Macrobrachium rosenbergii nodavirus displaying M2e of influenza A viruses protect White Leghorn chickens against heterologous H9N2 and H5N2 challenges, Developmental and Comparative Immunology, https://doi.org/10.1016/ j.dci.2025.105526.