一箭双雕！嵌合 VLPs 疫苗为家禽双重呼吸道病毒防护开辟新路径

研究背景

H9N2 AIV 和QX-type IBV 是全球家禽产业的主要威胁，二者常混合感染，导致家禽死亡率上升、产蛋量下降，造成巨大经济损失。传统减毒或灭活疫苗依赖鸡胚生产，流程复杂且难以应对病毒频繁的抗原漂移。病毒样颗粒（VLPs）因安全、免疫原性强等优势，成为替代传统疫苗的热门平台，而针对这两种病毒的嵌合 VLPs 疫苗研究此前较为匮乏。

关键突破

精准设计：成功构建三重蛋白嵌合 VLPs 表达体系

研究团队设计的嵌合 VLPs 由三种蛋白组成：来自H9N2 AIV 的 HA 和 M1 蛋白，以及融合了H9N2 HA 跨膜域（TM）和胞质尾域（CTD）的QX-type IBV S1 亚基重组蛋白（rS）。通过密码子优化后，将三种基因克隆至 pFastBacHT B 载体，利用 Bac-to-Bac 系统成功构建重组杆状病毒，并在 Sf9 昆虫细胞中实现高效表达，Western blot 和间接免疫荧光 assay（IFA）均验证了目标蛋白的表达（图1）。

高效制备：获得高纯度、形态完整的嵌合 VLPs

通过共感染表达 HA、M1 和 rS 的重组杆状病毒，在 Sf9 悬浮细胞中诱导 VLPs 自组装，经蔗糖密度梯度离心纯化后，获得了高纯度的嵌合 VLPs。透射电镜观察显示，该 VLPs 呈球形，表面有棘突，直径约 70-120 nm，与野生型H9N2 AIV 形态相似，且 Western blot 证实其包含三种目标蛋白，为后续免疫实验奠定了基础（图 2）。

强效防护：对H9N2 AIV 实现完全免疫保护

7-10 日龄 SPF 鸡经不同剂量 VLPs 疫苗免疫后，21 天血清中血凝抑制（HI）抗体和病毒中和（VN）抗体水平显著升高，90μg 剂量组抗体效价与商用疫苗相当。攻毒实验表明，该疫苗可使鸡的病毒排毒率降至 10%-20%，且气管和肺组织无明显病理损伤，实现了对H9N2 AIV 的完全保护（图 3）。

显著抑制：有效抵御QX-type IBV 感染

针对QX-type IBV，VLPs 疫苗可诱导特异性 IgG 抗体和中和抗体产生，90μg 剂量组在攻毒后 12 天，咽喉和泄殖腔病毒排毒量与商用疫苗无显著差异（图5）。

同时，该疫苗能显著降低气管、肺和肾脏中的病毒载量，减轻气管纤毛损伤及组织炎症，其中 90μg 剂量组仅出现轻微肺部病变，保护效果显著（图 6）。

结论与展望

本研究成功开发出基于嵌合 VLPs 的双价疫苗，该疫苗通过杆状病毒 / 昆虫细胞系统高效制备，兼具安全性与强免疫原性，对H9N2 AIV 和QX-type IBV 均能提供有效防护，尤其 90μg 剂量表现最佳。该成果突破了传统疫苗的局限，为家禽多重病毒感染的防控提供了新策略。未来可进一步优化 VLPs 结构，探索 HA 与 rS 的空间相互作用，尝试联合免疫策略降低接种剂量，同时拓展其对不同亚型或变异株的交叉保护效果，推动该类疫苗的产业化应用。

参考文献：

Qiao B, Meng Q, Zhao N, Gao Z, Tian Y, Hu X, Jiang C, Song X, Ping J. Development of a baculovirus-derived chimeric virus-like particles against QX-type avian infectious bronchitis and H9N2 avian influenza. Veterinary Vaccine 4 (2025) 100119.