牛结核病是危害性极大的动物疫病，由结核分枝杆菌（尤其是牛结核分枝杆菌）引起。患病牛会通过咳嗽传播病菌，既让牛群患病、给养殖带来损失，还可能通过飞沫或受污染的乳制品感染人——全球约5%-10%的人类结核病由牛分枝杆菌导致。目前常用的卡介苗对成年牛保护效果差，新型疫苗的开发应用迫在眉睫。

近日，宁夏大学和南京大学团队研发出一款针对结核分枝杆菌的新型疫苗候选物，这款疫苗以牛结核病防控为核心，不仅在犊牛身上效果好，还能为阻断结核病“由牛传人”提供帮助。

图 1 重组载体pFastBac dual-71CA-mCherry的示意图

此次研发的疫苗候选物，以结核分枝杆菌PE/PPE基因家族中的MTB39A蛋白（牛结核病致病相关关键抗原）和分子佐剂MTB32C蛋白为核心，通过昆虫-杆状病毒表达系统构建重组颗粒rvAc-71CA/rvAc-MTB39A。

图 2 通过mCherry荧光观察rvAc-71CA-mCherry感染的Sf9细胞

该系统具备高安全性、高抗原表达效率的优势，此前已成功应用于多种疫苗生产，此次适配动物疫病防控需求，进一步优化了抗原表面展示技术，确保疫苗在牛体内能高效激发免疫应答。

图 3 小鼠实验免疫原性分析

实验结果显示，该重组疫苗在BALB/c小鼠中能诱导强烈的体液免疫和细胞免疫应答：免疫后35天和42天，小鼠血清中抗MTB39A IgG抗体水平显著高于卡介苗组和对照组；脾淋巴细胞增殖指数明显提升，IL-12p40、TNF-α等关键细胞因子分泌量大幅增加。

通过流式细胞术相关分析，明确了检测T细胞的基础方法，对比了不同免疫组小鼠脾淋巴细胞中CD4⁺/CD8⁺T细胞的比例，发现rvAc-MTB39A侧重激活CD4⁺T细胞、rvAc-71CA侧重激活CD8⁺T细胞，同时证实rvAc-71CA能更强地激活分泌IFN-γ和IL-4的T细胞，从而增强细胞免疫应答。

通过对小鼠心、肝、脾、肺、肾的HE染色观察，显示所有免疫组器官均未出现病理改变，证明疫苗无器官毒性、生物相容性良好，全面验证了疫苗在小鼠体内的免疫有效性与安全性。

图 4 犊牛免疫原性分析

在犊牛模型中，该疫苗同样表现出色。免疫后30天、60天和90天，犊牛血清中IgG抗体水平持续维持在高位，TNF-α和IFN-γ等细胞因子水平显著高于对照组，表明疫苗能有效激发牛群的Th1型细胞免疫和体液免疫，为防控牛结核病提供了新工具，该疫苗的研发也为实现人兽共患病的一体化防控提供了可能。

与现有候选疫苗相比，该新型疫苗无需依赖卡介苗初免，可直接实现有效免疫，且通过表面展示技术增强了抗原免疫原性。研究团队表示，下一步将开展进一步的保护效力试验和临床前研究，优化疫苗配方和接种策略，有望开发出替代卡介苗的新一代结核病疫苗，为全球结核病防控贡献中国方案。

原文链接：https://doi.org/10.3390/ijms26020797