给疫苗“喝”口好汤：营养复溶让沙门氏菌活苗在鸡体内扎根更久

在体外阶段，研究首先证实冻干 Vaxsafe ST 与水或营养肉汤复溶后的活菌数在 4 h 内无统计学差异，说明冻干损伤对即时存活影响极小；然而当疫苗在 25 ℃或 37 ℃孵育 90 min 后侵袭 Caco-2 单层时，营养肉汤组的入侵菌量较水组提高 2–3 倍，5 ℃环境下则需 120 min 才达峰值，表明温度与营养共同加速疫苗菌从“休眠”到“侵袭”状态的切换。转录组层面，营养复溶 30 min 即可触发 415 个基因显著上调，涵盖磷酸转移酶系统（PTS）、戊糖磷酸途径、果糖-甘露糖代谢、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢、精氨酸-脯氨酸代谢、嘧啶代谢及氮代谢，表明碳源利用与能量生成被迅速激活；同时 Sec 分泌系统（secD、secE、secG、yajC）、鞭毛组装（fliC、flgH、flgI、flgM、flgD、fliT、fliZ）和趋化信号（cheR、cheM、cheW）相关基因平均上调 2–6 倍，hilA（SPI-1 主调控子）亦显著升高，意味着疫苗菌在穿过肠道黏液层前已提前表达运动与接触分泌装置，为后续定植奠定基础。相反，水复溶组 126 个基因下调，主要涉及苯丙氨酸-酪氨酸-色氨酸合成、核糖体生物发生及 tRNA 氨酰化，提示贫瘠环境迫使菌体进入“代谢节流”模式，侵袭相关表型被抑制。

图 1 与营养肉汤中重构的疫苗株上调差异表达基因相关的 KEGG 生物通路

进入一日龄褐壳蛋鸡模型后，疫苗的体内分布呈现明显的“肠-系”双轨定植特征：盲肠作为首要靶位，两组在 7 日与 14 日均保持 100 % 检出率，载菌量由 10⁸ CFU/g 缓慢降至 10⁶ CFU/g，差异不显著，说明盲肠富含厌氧发酵产物与淋巴组织，为减毒株提供了稳定生态位；而回肠、肝脏与脾脏的定植效率则显著受复溶介质影响。7 日龄时，营养肉汤组回肠阳性率即达 80 % 以上，水组不足 40 %；同期肝脏与脾脏分离阳性率两组均较高，但至 14 日龄，水组肝内疫苗检出率骤降（p = 0.025），脾内亦仅“水+30 min”组显著下降，而“营养肉汤+30 min”组在肝、脾仍维持 >50 % 与 100 % 的阳性率，表明营养复溶不仅帮助疫苗菌跨越胃酸屏障，更使其在系统器官内存活时间延长，为诱发全身免疫提供持续抗原刺激。值得注意的是，30 min 孵育步骤本身对最终定植无显著增益，意味着现场可即配即饮，无需额外等待，降低了操作复杂度。

从免疫生物学角度观察，营养复溶并未上调 sopE2、sipA 等强毒力效应蛋白基因，SPI-2 核心基因亦保持静默，疫苗仍维持减毒表型；但其通过提高鞭毛频率与趋化灵敏度，增强了对肠上皮微褶皱（M 细胞）的识别与接触，为后续树突状细胞采样和 sIgA 应答创造有利条件。作者进一步指出，传统营养肉汤含动物源蛋白胨，存在病毒、朊病毒与细菌污染风险，不适合食品动物；而以大豆、豌豆、棉花籽等植物源蛋白胨配制的无动物组分培养基可在体外提供同等侵袭激活效果，并已在大肠杆菌、狂犬病疫苗生产中验证安全性与可放大性。植物配方与现有喷雾或饮水免疫设备完全兼容，不增加额外成本，却可显著提升疫苗菌在肠道近端与免疫器官中的“落地”效率，为突破当前活疫苗定植弱、免疫晚、保护期短的瓶颈提供了一条简便易行的升级路径。

综上，本研究从现象到机制、从体外到体内、从分子表达到器官分布，层层递进地证明：复溶介质不是“稀释液”而是“启动液”，营养信号可在分钟尺度唤醒减毒沙门氏菌的代谢与运动基因，转化为持续十余日的定植优势；将这一发现转化为植物源营养稀释剂，有望在不改变现有免疫流程的前提下，让每一滴饮水都变成疫苗的“助推器”，为家禽沙门氏菌防控打开“即配即用、高效定植”的新篇章。

来源：10.1080/01652176.2025.2485480