DPV-2A1-E双价活载体疫苗：单针诱导鸭坦布苏与鸭瘟完全保护

背景知识

鸭瘟病毒（Duck Plague Virus, DPV）和鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu Virus, DTMUV）是当前危害养鸭业的两种主要病原体。DPV感染可引起急性、败血性疾病，死亡率高达100%；而DTMUV自2010年在中国暴发以来，迅速蔓延，导致蛋鸭产蛋量骤降、雏鸭生长迟缓，甚至死亡，其传播途径多样，包括垂直传播、蚊虫叮咬和水平传播，且具备跨物种感染能力，存在潜在的人畜共患风险。目前针对这两种病毒的疫苗主要为单价疫苗或需多次免疫，存在免疫程序复杂、成本高等问题。因此，开发一种安全、高效、单剂量即可完成免疫的双价疫苗成为迫切需求。

研究方法

这篇文章主要以减毒鸭瘟病毒（DPV CHa株）为载体，利用鸭肝炎A病毒1型（DHAV-1）2A1蛋白的核糖体跳跃功能，将DTMUV的E蛋白（主要抗原）插入至DPV高表达蛋白pUL49的终止密码子前，构建重组病毒DPV-(UL49-2A1-E)。研究首先通过分子克隆和同源重组技术获得重组病毒，随后对其体外和体内的遗传稳定性、蛋白表达情况、病毒复制能力进行系统评估。接着，通过动物实验评估该疫苗在雏鸭体内的免疫原性，包括中和抗体和特异性IgG抗体的产生情况。最后，通过攻毒实验检测疫苗对DPV和DTMUV致死性毒株的保护效果，并分析攻毒后组织中的病毒载量和病理变化。

重组病毒DPV-(UL49-2A1-E)构造示意图

研究结果

研究成功构建了重组病毒DPV-(UL49-2A1-E)，并通过PCR、Western blot和免疫荧光等手段证实其能稳定表达DTMUV的E蛋白，且插入外源基因未影响病毒的复制能力和遗传稳定性。动物实验显示，该疫苗一次免疫后1周内即可诱导雏鸭产生针对DPV和DTMUV的中和抗体，抗体水平在6周达到高峰，并可持续至18周。ELISA结果亦表明，疫苗组鸭体内的特异性IgG抗体水平显著高于对照组。攻毒实验中，疫苗组对DPV和DTMUV的致死性攻击均表现出100%的保护率，体温、体重正常，无死亡；而对照组则出现明显临床症状、体重下降甚至死亡。病毒载量检测结果显示，疫苗组能有效抑制病毒在多种组织中的复制，组织病理检查亦未发现明显病变，进一步验证了疫苗的保护效果。

结论与意义

首次利用DHAV-1 2A1蛋白的核糖体跳跃功能，在DPV的高表达蛋白pUL49前插入DTMUV的E蛋白，构建出一种高效、单剂量、双价疫苗。该疫苗不仅具备良好的遗传稳定性和免疫原性，还能提供对DPV和DTMUV的完全保护，显著优于现有疫苗。此策略为开发多价、低成本、程序简化的禽类疫苗提供了新思路和技术平台，具有重要的应用前景和推广价值。

参考来源：Wu L, Deng X, Wang M, Cheng A. An efficient bivalent vaccine against duck Tembusu and duck plague viruses based on ribosomal skipping of DHAV-1 2A1 and abundant expression of DPV protein. Poult Sci. 2025 Aug;104(8):105317. doi: 10.1016/j.psj.2025.105317.