无血清培养也能高产：BioNOC II®宏载体+BelloStage™-3000，让狂犬病毒在BSR/Vero细胞中‘跑出加速度’

图 BioNOC II™巨载体上BSR和Vero细胞培养过程中关键参数的动态变化。

无血清：不是“省一步”，而是更稳、更安全

传统含血清培养虽然常见，但血清带来的批间差异、潜在污染与监管压力，都是疫苗放大生产时的“隐形成本”。该研究选择无动物源成分的OptiPRO™ SFM进行对比培养，意在把工艺稳定性与生物安全性前置到研发阶段。

宏载体+“潮汐运动”：让细胞长得更密、病毒产得更多

研究把两类路线放在同一张“成绩单”上：

· 传统微载体：Cytodex 1 / Cytodex 3，用磁力搅拌瓶培养；

· 宏载体体系：BioNOC II® + BelloStage™-3000（潮汐式温和混合，降低剪切损伤），并配合BelloCell™ 500A一次性培养瓶。

在宏载体体系下，细胞贴附效率很高：BSR约98%、Vero约95%；细胞规模也更可观：BSR最高达约3.5×10⁹（第5天），Vero约2.8×10⁹（第7天）。

谁更“能产”？BSR细胞在产量上领先

病毒扩增结果显示，两条细胞系都能在宏载体体系中获得高滴度，但BSR细胞的峰值产量更高：

· BSR：峰值滴度约 5.6×10⁸ FFU/mL（感染后第4天）；

· Vero：峰值滴度约 2.0×10⁸ FFU/mL（感染后第5天）。

与传统微载体相比：提升不止“一个档位”

如果用“倍数”来理解差距，宏载体+BelloStage™-3000的优势更直观：

· BSR体系：相对Cytodex 1 / Cytodex 3，滴度约提升 19.3倍 / 15.3倍；

· Vero体系：相对Cytodex 1 / Cytodex 3，滴度约提升 14.0倍 / 9.6倍。

研究还给出了三类载体下的“最大滴度（log10 FFU/mL）”对比：

· BSR：Cytodex 1（7.48）< Cytodex 3（7.58）<< BioNOC II®（8.75）

· Vero：Cytodex 1（7.18）< Cytodex 3（7.32）<< BioNOC II®（8.30）

关键发现

· BioNOC II®宏载体 + BelloStage™-3000（潮汐运动）在无血清条件下，可显著提高BSR与Vero细胞的狂犬病毒产量。

· BSR细胞达到的峰值滴度（5.6×10⁸ FFU/mL）高于Vero（2.0×10⁸ FFU/mL），显示其作为生产底物的潜力。

· 与Cytodex 1/3微载体体系相比，宏载体体系带来约9.6–19.3倍的滴度提升（依细胞系与对照而定）。

· 该平台结合一次性培养瓶与无血清培养基，强调“可放大、可复现、偏GMP友好”的工艺方向，面向动物狂犬病疫苗生产场景。

参考文献

Amanova, Z., Sametova, Z., Turyskeldy, S., Kurmasheva, A., Abitayev, R., Ussembay, A., Kondibaeva, Z., Toktyrova, D., Mazbayeva, D., Nurabayev, S., Kerimbayev, A., & Bulatov, Y. (2025). Efficient serum-free rabies virus propagation using BSR and vero cell lines: A comparative evaluation of BioNOC II® macrocarriers in the BelloStageTM-3000 bioreactor versus conventional microcarriers. Biology, 14(10), 1455. https://doi.org/10.3390/biology14101455