TbpBY167A疫苗在无初乳仔猪中驱动双相T细胞应答：从初始到记忆，锁定副猪格拉瑟氏菌交叉保护的关键钥匙

背景知识

副猪格拉瑟氏菌是引起猪格拉瑟氏病的主要病原，其高抗原变异性使传统自家菌苗交叉保护不足。铁获取关键蛋白 TbpB 序列保守，可同时诱导体液与 T 细胞应答，被视为广谱疫苗靶点，但其在猪体内的细胞免疫时序特征尚不清楚。解析不同 T 细胞亚群在免疫-感染过程中的动态变化，可为下一代疫苗的理性设计提供免疫学依据。

研究方法

研究人员实验选用 10 头无初乳长白×大白（杂交猪）仔猪，随机分为免疫组与 PBS 对照组（n=5）。免疫组于 15 日龄和 30 日龄经口接种 TbpBY167A 突变蛋白，45 日龄时两组均经鼻攻毒（5×106 CFU，混合血清型 1/4/7 强毒株）。在首免前、二免前、二免后 15 d（攻毒前）及攻毒后 1 d、3 d 采集外周血，分离 PBMC 并液氮冻存。采用多色流式细胞术（流式细胞术抗体组合涵盖 sIgM/CD172a/CD3/TCRγδ/CD8αβ/CD4/CD27 等标记）定量主要白细胞亚群及 T 细胞初始/记忆表型。数据以广义线性模型与独立/配对 t 检验分析，Bonferroni 校正多重比较。

研究结果

1、免疫阶段

首剂疫苗未引起显著变化；二剂后免疫组 B 细胞、总 T 细胞、TCRγδ T 细胞、CD8⁺αβ 细胞、CD4+ 初始细胞、记忆细胞以及双阴性 αβ T 细胞均显著高于对照（p<0.01–0.001）。

2、攻毒阶段

免疫组与非免疫组在 1 dpi 与 3 dpi 的主要白细胞总数差异不显著，但免疫组内部呈现 CD8⁺ 细胞快速分化：初始 CTL（CD8β+ CD27+ ）在 1→3 dpi 显著下降，记忆 CTL（CD8β+ CD27- ）同步上升（p<0.05）；CD4+ 亚群及非 CTL 细胞变化不显著。

非免疫组在 3 dpi 仅存活 2 头，提示缺乏疫苗保护。

结论与意义

TbpBY167A 疫苗通过“启动-强化”模式诱导典型的双相 T 细胞应答：强化剂协同扩增细胞毒、记忆与非常规 T 细胞亚群；攻毒后免疫猪 CD8+CTL 迅速由 初始表型转为记忆表型，与疾病保护同步。该研究首次在猪模型中阐明 TbpB 疫苗的细胞免疫相关物，为筛选可诱导广谱细胞免疫的佐剂、递送途径及评价指标提供了可直接应用的免疫学框架，并支持将 T 细胞应答纳入副猪格拉瑟氏菌下一代疫苗的研发目标。

参考来源：González-Fernández, A.; García-Iglesias, M.J.; Gutiérrez-Martín, C.B.; Mencía-Ares, Ó.; Martínez-Martínez, S. Temporal Dynamics of T Cell Immunity Induced by TbpBY167A Vaccine in Colostrum-Deprived Piglets Challenged with Glaesserella parasuis. Vet. Sci. 2026, 13, 73. https://doi.org/10.3390/vetsci13010073.