欧洲EHDV-8防控新希望：实验证实新型疫苗可完全阻断病毒血症与疾病

背景

流行性出血病病毒血清8型（EHDV-8）作为一种由库蠓传播、影响牛羊等反刍动物的烈性病毒，突破其传统疫区（非洲、美洲），在意大利、西班牙等南欧国家引发跨物种的广泛疫情。此次入侵不仅对畜牧业构成直接经济威胁，更暴露出一个关键的防控短板：市场上缺乏针对该新兴血清型的商用疫苗。在没有有效免疫屏障的情况下，病毒得以借助媒介昆虫快速扩散，使传统的检疫和扑杀措施捉襟见肘，从而催生了对于研发安全、高效且适用于大规模免疫的新型疫苗的紧迫需求。

在此背景下，本研究的目标直指这一防控缺口，致力于开发一种具备战略优势的下一代疫苗。研究团队没有选择传统的灭活全病毒路径，而是精准地瞄准了病毒外壳的VP2蛋白。VP2是诱导产生中和抗体的关键抗原，也是病毒血清型特异性的决定因素。利用杆状病毒表达系统生产出高纯度的重组VP2蛋白，并制成亚单位疫苗，其核心设计优势在于兼具三重潜力：激发针对性的强免疫保护、实现“DIVA”能力以支持持续疫情监测，以及为未来开发涵盖多血清型的联合疫苗奠定技术基础。这项研究正是在EHDV-8疫情告急与疫苗技术迭代的双重驱动下，为填补欧洲防控体系的关键空白而开展的一次针对性攻关。

研究结果

1.  疫苗具备良好的表达纯化与抗原完整性。研究通过昆虫细胞SF9成功表达并纯化了EHDV-8 rVP2蛋白，其分子量约为115 kDa。Western Blot与SDS-PAGE分析显示，该蛋白条带清晰、纯度良好，且能与抗His标签、抗V5标签及EHDV-8特异性抗体发生反应（图1、图2），表明重组蛋白结构正确、抗原性完整，适用于疫苗制备。

图1 在Sf9细胞中检测rVP2表达

图2 重组VP2蛋白的纯化与免疫印迹验证

2.  疫苗诱导快速且高效的中和抗体应答。接种疫苗的犊牛在初次免疫后未立即产生中和抗体，但在加强免疫（第21天）后7天（即第28天），所有接种动物均检出中和抗体，滴度范围为20–160。至攻毒前（第35天），抗体滴度进一步上升至40–320（图3）。这表明疫苗能有效激发血清型特异的体液免疫应答，为后续攻毒保护奠定了免疫基础。

图3 模拟接种（C）和rVP2接种（V型）小牛的中和抗体（Nab）反应

3.  疫苗提供完全临床保护并彻底阻断病毒血症。攻毒实验显示，所有接种疫苗的犊牛在攻毒后均未出现病毒血症，其血液样本在整个观察期间实时荧光定量PCR检测均为阴性（图4）。同时，接种动物无任何发热、口腔糜烂、淋巴结肿大、呼吸困难等EHDV相关临床症状（图5）。相比之下，所有对照动物均出现持续病毒血症，且多数表现出轻度至中度的临床症状。这说明该疫苗不仅能预防疾病，还能实现“ sterilizing immunity”，彻底抑制病毒在体内的复制与扩散。

图4 模拟接种（C）和rVP2接种（V）小牛的RNA血症随时间变化

图5 模拟和rVP2疫苗接种小牛在挑战后临床评分

4.  疫苗具备明确的DIVA（区分感染与接种动物）能力。通过VP7竞争ELISA检测发现，即便在攻毒后，所有接种疫苗的动物仍保持VP7抗体阴性，而所有对照动物均在攻毒后10天转为阳性。这一结果证明，该rVP2疫苗不干扰基于VP7的血清学监测，可用于在接种群体中区分自然感染个体，有利于疫情监测和净化计划的实施。

5.  疫苗安全性良好，仅引起轻微局部反应。接种动物在注射后出现短暂性低热（持续3–5天）及注射部位结节（直径≤8 cm），但均在1周内自行消退，未见全身性严重不良反应。这些反应与目前市场上已应用的EHDV灭活疫苗相似，主要归因于佐剂效应，整体安全性可接受。

总结与展望

本研究成功开发的基于杆状病毒表达的EHDV-8重组VP2亚单位疫苗，在实验条件下展现出优异的免疫保护效果、可靠的安全性和明确的DIVA能力，不仅能够完全预防病毒感染和临床症状，还能阻断病毒传播链。未来研究应着重在田间条件下扩大验证范围，优化免疫程序和抗原剂量，拓展其在野生动物中的适用性，并推动多价疫苗的开发与产业化进程，以构建更为完善的EHDV-8综合防控体系。

来源：https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2025.128000