新型多糖-铝佐剂皮克林乳剂成功研发，显著提升猪伪狂犬病疫苗免疫效能

研究背景

疫苗接种是预防和控制人与动物传染病最为经济有效的手段，而佐剂作为疫苗的关键组成，其作用是显著增强免疫应答的强度、广度和持久性。在众多佐剂中，传统铝佐剂因其良好的安全性和有效性，在人类和动物疫苗中应用最为广泛。然而，铝佐剂主要诱导Th2型体液免疫，对细胞免疫的激活能力不足，这限制了其在对抗细胞内病原体（如病毒）的疫苗中的应用，因为此类疫苗通常需要强烈的Th1型细胞免疫应答。为此，近年来，科研人员致力于开发既能增强体液免疫又能激活细胞免疫的新型佐剂。

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒（PRV）引起的严重传染病，对全球养猪业造成重大经济损失。目前使用的灭活PRV疫苗安全性高，但其免疫原性较弱，保护效果有限。为提高疫苗效力，常需佐剂辅助。传统铝佐剂难以有效激发细胞免疫，而兽用疫苗中常见的矿物油佐剂虽能增强免疫，却易引起局部肉芽肿、脓肿等不良反应，且注射性差。因此，亟需研发一种既能高效激活体液与细胞免疫，又具备良好安全性与适用性的新型佐剂，以提升PRV灭活疫苗的保护效力。本研究在此背景下，聚焦于开发基于茯苓多糖与铝佐剂结合的皮克林乳剂（PAPE），旨在构建一种协同性强、稳定性高、生物安全性好的新型疫苗佐剂系统。

研究结论

本研究成功制备了茯苓多糖-铝Pickering乳剂（PAPE），并负载PRV灭活抗原形成PAPE-PRV疫苗。表征结果显示，PCP-Al呈棒状，PAPE呈覆盆子状，粒径分别为约558 nm和2478 nm，表面带正电，多糖负载率约73.6%，抗原吸附效率约57.3%。疫苗在4℃下储存21天仍保持良好的物理稳定性，表明其具备作为疫苗递送系统的基本条件。

图1 PAPE及基于PAPE的疫苗的特性分析

通过巨噬细胞摄取实验发现，PAPE能显著提升抗原内吞效率（85.05%），远超游离抗原（5.03%）和单纯多糖组（6.13%）。机制研究表明，该摄取过程主要依赖于清道夫受体A介导的内吞作用，因为抑制剂硫酸葡聚糖可显著抑制摄取效率，而其他内吞途径抑制剂影响不大，说明PAPE能高效靶向APC并促进抗原递呈。

图2 PAPE通过清道夫受体A介导的内吞作用改善巨噬细胞对抗原的摄取

免疫后48小时，PAPE-PRV在注射部位显著增加了树突细胞（CD11c⁺）和巨噬细胞（F4/80⁺）的募集数量，并上调其激活标志CD80的表达。效果优于铝佐剂、多糖-铝复合物及商用油佐剂ISA206，表明PAPE能快速启动局部免疫反应，为后续系统性免疫应答奠定基础。

图3 PAPE-PRV在注射部位显著招募并激活抗原呈递细胞

血清学检测显示，PAPE-PRV能高效诱导PRV gB特异性抗体，滴度高于ISA206-PRV。同时，它促进IgG1（Th2型）、IgG2a和IgG2b（Th1型）抗体亚类的产生，显示其能平衡激活Th1/Th2免疫通路。此外，PAPE-PRV还显著增加了脾脏浆细胞和引流淋巴结中滤泡辅助T细胞的比例，进一步证实其增强体液免疫与长效抗体保护的能力。

图4 PAPE-PRV增强了体液免疫反应

PAPE-PRV显著提升了脾脏中CD4⁺和CD8⁺ T细胞的比例，并增强CD8⁺细胞毒性T细胞的活性，表现为CD107a和FasL表达上调、颗粒酶B分泌增加。同时，疫苗促进了IFN-γ（Th1）和IL-4（Th2）细胞因子的分泌，说明PAPE能协同诱导细胞免疫与体液免疫，形成全面免疫保护。

图5 PAPE-PRV诱导了强大的细胞免疫反应

在免疫后第21天和第28天，PAPE-PRV显著增加了中央记忆T细胞（Tcm）和效应记忆T细胞（Tem）在CD8⁺ T细胞中的比例。这表明PAPE不仅能激发即时免疫反应，还能诱导长效免疫记忆，为抵御二次感染提供持续保护。

图6 记忆CD8T细胞的反应

总结与展望

本研究成功开发并系统评估了一种新型佐剂系统——茯苓多糖-铝Pickering乳剂（PAPE），并将其应用于猪伪狂犬病毒灭活疫苗中。研究证实，PAPE具备良好的理化稳定性与生物相容性，能通过清道夫受体A介导的内吞作用增强抗原递送，在注射部位高效募集并激活抗原呈递细胞，同时激发强效且平衡的体液与细胞免疫应答，并促进长效免疫记忆形成。其佐剂性能显著优于传统铝佐剂与商用油佐剂ISA206，展现出作为动物疫苗增强剂的良好潜力。

未来研究可从以下方面进一步拓展：一是深化PAPE激活免疫信号通路的分子机制研究，明确其与模式识别受体的相互作用及淋巴结靶向递送机制；二是在猪等实际宿主中开展免疫保护效力与安全性评价，推动其向临床应用转化；三是拓展PAPE在其他兽医或人用疫苗平台中的应用，验证其广谱佐剂潜力；四是优化其制剂工艺，提升稳定性与规模化生产能力，为新型疫苗佐剂的开发提供系统支持。

来源：https://doi.org/10.1016/j.partic.2026.01.023