背景

非伤寒沙门氏菌感染是全球重要公共卫生问题，在畜禽养殖中造成经济损失与食品安全隐患，而细菌耐药性加剧导致传统抗生素防控效果大幅下降，亟需安全高效的非抗生素替代方案。噬菌体疗法与疫苗是当前最具潜力的方向：噬菌体特异性强、不破坏正常菌群且可在感染位点自我扩增；减毒活疫苗能同时诱导体液与细胞免疫，提供持久保护，但单一使用均存在保护不完全等局限。

将噬菌体与疫苗联用可发挥互补优势：疫苗建立免疫记忆，噬菌体直接裂解细菌、降低菌负荷并促进抗原释放，协同提升抗感染效果。本研究正是基于这一思路，分离鉴定新型沙门氏菌裂解噬菌体Sal‑P001，并评估其与RAST002疫苗联用的免疫效果与保护效力，为沙门氏菌防控提供新策略。

研究结果

图1 噬菌体Sal-P001的形态

图1 展示Sal‑P001的噬菌斑与电镜形态，该噬菌体在双层琼脂平板上形成清晰噬菌斑，呈典型裂解性；电镜观察可见二十面体头部与可收缩长尾，归属肌病毒科，明确其分类与裂解特性。

图2 噬菌体Sal-P001的生物学特性

图 2 系统解析了Sal‑P001的增殖规律与环境耐受能力，全面揭示其应用潜力。在生长特性方面，该噬菌体的最佳感染复数为0.1，此条件下子代噬菌体产量最高；一步生长曲线显示其潜伏期约20分钟，裂解期持续20–100分钟，平均裂解量高达458 PFU/细胞，增殖速度快、子代产量大，杀菌效率突出。在环境稳定性方面，Sal‑P001展现出极强的耐受能力，在37–72℃温度范围内孵育60分钟仍保持高感染活性，仅80℃条件下活性快速丧失；同时在pH2–12的宽泛酸碱环境中处理1小时，滴度无显著下降，耐高温、耐酸碱的特性使其能适应畜禽体内复杂环境与工业化生产需求，具备优异的实际应用价值。

图3 RASTo02和Sal-P001联合方案诱导的体液和细胞免疫应答

图3 全面评估了Sal‑P001与RAST002疫苗联合使用诱导的体液、黏膜及细胞免疫应答水平。体液免疫结果显示，联合处理组小鼠血清中沙门氏菌外膜蛋白特异性IgG滴度显著高于单一噬菌体组与对照组，加强免疫后抗体水平进一步提升；黏膜免疫方面，阴道灌洗液中特异性分泌型IgA水平同样大幅升高，证明联用策略可有效激活呼吸道、肠道等黏膜屏障免疫，构筑第一道抗感染防线。细胞免疫检测发现，联用组小鼠脾淋巴细胞在体外抗原刺激后，增殖活性与刺激指数显著高于其他组；细胞因子检测显示IFN‑γ分泌量大幅升高，IL‑4水平相对较低，呈现明显的Th1型免疫偏向，而Th1型免疫正是清除胞内寄生沙门氏菌的关键，证实联用可协同激活全身与局部免疫，构建全方位免疫保护网络。

图4 小鼠在接受不同沙门氏菌菌株挑战后的存活情况

图4 通过小鼠攻毒实验直观验证不同处理组的抗感染保护效力，实验选用鼠伤寒沙门氏菌标准株及3株野生型肠炎沙门氏菌进行10倍半数致死量攻击。结果显示，空白对照组无死亡，缓冲液对照组小鼠全部死亡，无任何保护效果；单一Sal‑P001噬菌体处理组仅能提供部分保护，不同菌株攻击后存活率在60%–80%之间；而Sal‑P001与RAST002联合处理组，在所有同源及异源沙门氏菌菌株攻击后，小鼠存活率均达到100%，生存曲线全程保持平稳，无死亡病例，充分证明噬菌体与疫苗联用的协同保护作用，可实现对多种血清型沙门氏菌感染的完全防护，效果远优于单一噬菌体疗法。

总结与展望

本研究成功从山东家禽场污水中分离到广谱、高稳定性的沙门氏菌裂解噬菌体Sal‑P001，其与减毒疫苗RAST002联合使用，能协同诱导强而全面的免疫应答，突破单一疗法保护不足的局限，对同源与异源沙门氏菌均实现完全保护。该噬菌体‑疫苗联合策略安全有效，为畜禽养殖中耐药沙门氏菌防控提供了可转化的新路径，具有重要应用前景。

样品来源：

Zhang J, Zhang Z, Yang D, Ren Q, Cao S, Li Y, Zhou G. Combination of lytic phage Sal-P001 and RAST002 vaccine induces complete protection against homologous and heterologous Salmonella strains. Vaccine. 2026 Mar 10;79:128451. doi: 10.1016/j.vaccine.2026.128451. Epub ahead of print. PMID: 41812632.