背景知识

猪肺炎支原体是引起猪慢性呼吸道传染病（猪地方性肺炎）的主要病原体，导致咳嗽、哮喘、生长迟缓和肺损伤，给全球养猪业造成重大经济损失。研究表明，不同猪品种对Mhp的感染率和抗性存在显著差异，其中巴西地方品种皮奥猪以其对环境胁迫的强适应性和潜在的抗病性著称，但繁殖性能较低。疫苗接种是防控Mhp感染的主要策略，主要通过诱导体液免疫（IgG/IgA抗体）和细胞免疫产生保护力。免疫应答涉及先天免疫系统（通过TLRs识别病原体脂多糖并激活巨噬细胞，释放TNF-α、IL-6等促炎因子）和获得性免疫的协同作用，但关于地方品种或不同遗传群体对Mhp疫苗的免疫应答特征仍缺乏系统研究。

表 皮奥（P）与商业（C）品种猪外周血单核细胞中Toll样受体（TLR）基因及促炎和抗炎细胞因子基因的表达

研究方法

该研究采用两阶段实验设计。第一阶段选取6头皮奥猪和6头商业品种猪，在7日龄（T0）接种Mhp灭活疫苗，并于接种前及接种后10天（T1，17日龄）采集血液，通过密度梯度离心分离PBMC，利用RT-qPCR检测TLR2、TLR4、TLR6、TLR10及细胞因子（IL2、IL6、IL8、IL10、IL12、IL13、TNFα、TGFβ）的基因表达。第二阶段在10周龄时对每组6头接种猪和3头未接种对照猪实施安乐死，收集BALF样本，通过Griess比色法测定NO浓度，ELISA检测Mhp特异性IgG抗体水平，并同样采用RT-qPCR分析BALF细胞中TLRs和细胞因子的表达变化。基因表达数据采用2^(-ΔCt)法计算，使用GAPDH和HPRT1作为内参基因，通过SAS软件的PROC MIXED过程进行方差分析和t检验。

研究结果

研究结果显示，在PBMC中，商业猪接种后TLR2、TLR4、TLR6、TLR10、IL6、TNFα和TGFβ的表达水平显著升高，而Piau猪仅TLR6、TLR10和TGFβ表达上调，且商业猪的IL6表达水平在接种后显著高于皮奥猪。在BALF样本中，虽然NO产生在接种组间无显著差异，但皮奥猪接种疫苗后的特异性IgG抗体水平显著高于未接种组，而商业猪无此显著差异。基因表达分析表明，皮奥猪的BALF细胞在TLR4、TNFα和TGFβ基因上表现出显著的接种组间差异，而商业猪仅在TNFα上存在差异。品种间比较发现，接种猪中商业猪的TNFα和IL10表达显著高于皮奥猪，未接种组中TNFα也存在品种差异。这些结果提示皮奥猪对Mhp疫苗具有独特的黏膜免疫应答特征。

结论与意义

本研究表明，地方品种皮奥猪与商业品种猪在Mhp疫苗接种后的免疫应答存在显著遗传差异，表现为不同的TLRs识别模式、细胞因子表达谱和抗体产生能力。这些差异可能反映了品种间在Mhp抗性或耐受性方面的表型差异，支持将免疫应答特征作为遗传标记用于间接选择抗病个体的可行性。研究结果强调了在制定疫苗接种策略时考虑猪只遗传背景的重要性，并为进一步解析猪对传染病免疫应答的遗传机制提供了基础数据，有助于通过育种手段减少养猪业因Mhp感染造成的经济损失。

参考来源：Sousa KRS, de Melo Ferreira Dantas W, de Oliveira LL, Cardoso SA, Dos Santos Araújo R, Guimarães SEF. Effect of vaccination against Mycoplasma hyopneumoniae on divergent pig genetic groups. Res Vet Sci. 2024;180:105417. doi:10.1016/j.rvsc.2024.105417.