猪鼻支原体培养条件优化:20%马血清优于鸡血清
猪鼻支原体培养条件优化:20%马血清优于鸡血清
它不仅与多发性浆膜炎、关节炎等疾病相关,也可参与猪呼吸道综合征,造成生长迟缓,并增加继发感染风险。由于支原体没有细胞壁、代谢能力有限,对外源胆固醇和脂质等营养成分依赖很强,体外培养一直不算容易。培养条件不稳定,会直接影响临床分离效率、实验室鉴定速度,以及后续抗原制备和疫苗研究的推进。
本研究以4株来自猪肺病变样本的猪鼻支原体临床分离株为对象,在改良Friis培养基中分别加入10%、20%、30%的马血清或鸡血清,比较不同条件下的生长表现。研究者主要观察了两个指标:一是终末滴度,即培养到最后能达到多少数量级;二是达到一定菌量所需时间,也就是生长动力学。图1结果显示,6种培养条件都能支持支原体生长,但马血清总体明显更占优势。对多数菌株而言,20%马血清能获得最高终末滴度,最高可达109 CCU/mL,同时达到检测阈值的时间也更短,部分菌株只需3.6至6天。相比之下,鸡血清虽然并非完全无效,但整体产量更低、起长更慢,仅在个别菌株和部分阈值下表现接近马血清。
图1 四株M. hyorhinis分离株在添加不同血清的培养基中的最终生长产量
本研究还有一个很值得注意的结论:血清并不是“越多越好”。当马血清浓度从20%继续提高到30%时,部分菌株的终末滴度反而下降,提示高浓度血清中可能同时带入了抑制性成分,影响支原体增殖。鸡血清也呈现出明显的菌株依赖性,即不同分离株对同一种培养体系的响应并不一致。这说明,在支原体培养中,优化培养基并不是简单替换一种原料,而是要在营养供给、生长速度、抑制效应和成本之间寻找平衡。因此认为,20%马血清是当前实验条件下更稳妥的优选方案,而鸡血清可作为某些场景下的低成本替代思路,但仍需进一步按菌株验证。
从应用角度看,这项工作的重要性并不只在于“哪种血清更好”,更在于它给出了一个可操作的培养优化方向。对于猪病诊断实验室来说,更快的起长意味着更早的检出;对于抗原制备和疫苗研发来说,更高、更稳定的培养产量则关系到后续工艺放大和质量一致性,对诊断试剂生产和疫苗开发具有现实意义。
也正因为培养体系是研发链条里最基础、却最容易被低估的一环,产业端对培养基质量和配套方案的重视也在持续提高。环凯生物研发的培养基为临床检验、疫苗研发和生物制药提供基础支撑,兽用疫苗产品包括:布氏杆菌疫苗、仔猪副伤寒疫苗、猪水肿病疫苗、猪链球菌病疫苗、猪丹毒疫苗、猪巴氏杆菌疫苗、魏氏梭菌疫苗、鸡传染性鼻炎疫苗、鸡滑液囊支原体疫苗、鸭疫里默氏杆菌疫苗、鸭大肠杆菌疫苗等。
产品链接:https://www.bhkbio.com/list/308.html。
参考来源:Li, Y.-C.; Tseng, Y.-W.; Lin, W.-H.; Lin, C.-N.; Chiou, M.-T. Comparative Efficacy of Horse and Chicken Serum for the In Vitro Cultivation of Mycoplasma hyorhinis Clinical Isolates. Pathogens 2025, 14, 1056. https://doi.org/10.3390/pathogens14101056.
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