高效且“去血清化”:流感病毒培养技术的新突破
传统工艺的“瓶颈”与细胞培养的崛起
长期以来,全球流感疫苗的生产高度依赖受精鸡胚。尽管这一工艺成熟可靠,但其弊端也日益凸显:数以亿计的鸡蛋供应极易受禽流感疫情或供应链波动影响;更重要的是,流感病毒在鸡胚中传代时常发生“鸡胚适应性突变”,导致疫苗株的抗原性偏离循环株,从而降低疫苗保护效力。
近年来,基于细胞系的培养技术成为极具潜力的替代方案。马丁-达比狗肾细胞(MDCK)因其对流感病毒的高度易感性,已成为细胞法疫苗生产的首选。 然而,传统的贴壁MDCK细胞培养往往需要添加胎牛血清(FBS)。血清成分复杂、批次差异大,且存在支原体或病毒污染的风险,这给疫苗的纯化和标准化带来了挑战。
sMDCK悬浮细胞:打破“贴壁”与“血清”限制
为了解决上述问题,研究人员成功将贴壁MDCK细胞改造为可在无血清培养基中稳定生长的悬浮型细胞(sMDCK)。 这种“变身”带来了显著的生产优势:
1. 规模化潜力巨大:悬浮细胞在生物反应器中具有更高的比表面积,能达到更高的细胞密度,极大地提升了单位体积的病毒产量。
2. 经济效益显著:实验数据显示,采用sMDCK平台进行病毒增殖,其试剂和耗材成本仅为传统贴壁细胞法的61.4%。
3. 安全性更优:全程无血清(Serum-Free)环境消除了动物源性污染风险,简化了下游纯化工艺。 。
图1 sMDCK细胞对无血清培养、悬浮培养的适应性及其传代
广泛的毒株适用性与抗原稳定性
研究团队利用sMDCK平台对15种流感病毒株进行了验证,涵盖了5株H1N1、5株H3N2以及5株乙型流感病毒(包括Victoria和Yamagata系)。结果显示,所有毒株在sMDCK细胞中均能在1至3天内完成高效增殖。
在病毒质量方面,通过血凝效价(HAU)和斑点形成单位(PFU)测试证实,sMDCK产出的病毒效价与传统贴壁细胞相当。 关键的微量中和实验表明,产生的后代病毒保持了原始的抗原特性,这意味着该技术生产的疫苗能够精准匹配流行毒株。此外,研究还发现,细胞存活率的变化是监控病毒收获时间的有效指标,当感染48-72小时后细胞活力显著下降时,即为病毒采集的最佳时机。
展望科研与工业的未来
这种简单、可扩展且无需昂贵血清的培养方法,为流感病毒的流行病学研究、诊断试剂开发及疫苗研制开辟了新路径。它不仅能应对季节性流感的生产需求,在面对潜在的大流行威胁时,其快速响应能力更具战略意义。
在追求高效病毒培养的道路上,优质的培养基是成功的核心。广东环凯深耕微生物培养领域多年,致力于为科研与工业用户提供高性能的疫苗生产专用无血清培养基。我们的产品针对悬浮细胞(如sMDCK、CHO、Vero等)进行了深度优化,具有极佳的批次稳定性与促生长效能,助力您的病毒增殖实验实现更高产出与更优品质。选择环凯,让生物制药开发更简单、更安全。。
参考来源:J. B. Huskey, M. L. Rock, P. V. Chaudhary, et al. Strain Agnostic Influenza Virus Propagation in a Serum-Free, Suspension-Adapted MDCK Cell Line. Influenza and Other Respiratory Viruses 20, no. 3 (2026): e70237, https://doi.org/10.1111/irv.70237.
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