研究背景

口蹄疫病毒（FMDV）血清型多、变异快，传统灭活疫苗交叉保护差。T细胞应答在抗FMDV中至关重要，但保守T细胞表位尤其是CD8⁺表位鉴定不足。研究聚焦高保守非结构蛋白2B/2C，挖掘广谱T细胞表位，结合CD40L靶向递送，开发兼具细胞与体液免疫的广谱疫苗。

关键突破

1.明确2B/2C特异性T细胞应答动力学，锁定关键筛选窗口期

研究发现FMDV感染猪后，14dpc时2B/2C肽库诱导的IFN‑γ⁺CD4⁺与CD8⁺T细胞达峰值，28dpc仍维持记忆应答，确定感染早期为表位筛选最佳窗口，突破既往仅用恢复期样本的局限，为高效表位鉴定奠定基础（图1）。

图1：感染后不同时间T细胞IFN‑γ应答动态

2.精准筛选4个核心保守T细胞表位，兼具跨血清型与跨种识别潜力

通过重叠肽库与ELISpot、ICS等技术，鉴定2B31-48、2C109-126、2C151-168、2C157-174四个优势表位。其中2C157-174为SLA‑I/II双限制性双功能表位，2C109-126与2C157-174在7个血清型中100%保守，且可激活牛T细胞，为跨物种疫苗提供候选（图2、3）。

图2 表位筛选结果与SLA限制性分析

图3 表位筛选结果与SLA限制性、保守性分析

3.构建CD40L融合三聚体疫苗，显著提升抗原呈递与免疫原性

设计Trimer‑CD40L‑TB，整合CD40L、保守T/B表位与DN5B三聚化基序。三聚体构象提升B细胞表位呈递效率，CD40L靶向树突状细胞，促进其成熟与抗原摄取，上调CD80/CD86，强化免疫激活（图4、5）。

图4 疫苗构建

图5疫苗体外免疫活性验证

4.疫苗激发协同免疫，实现对O/A型FMDV100%交叉保护

Trimer‑CD40L‑TB强效激活Th1型CD4⁺与细胞毒性CD8⁺T细胞，促进中心记忆T细胞分化；同时加速生发中心形成、提升中和抗体滴度。攻毒试验显示，该疫苗为猪提供O/BY/2010与A/GDMM/2013株完全保护，仅含B表位的对照组无保护。

结论与展望

本研究首次系统鉴定FMDV2B/2C的保守CD4⁺/CD8⁺T细胞表位，证实T细胞应答是广谱交叉保护的核心；创新构建CD40L靶向三聚体多表位疫苗，实现细胞与体液免疫协同，在猪模型中达成O/A型完全保护。该策略突破传统疫苗依赖体液免疫、交叉保护弱的瓶颈，为FMDV广谱疫苗研发提供范式。未来需优化表位加工呈递效率，验证牛等其他易感动物的保护效果，结合SLA分型提升疫苗适配性，推进临床转化与产业化应用。

参考文献

Mu S, Shang S, Dong H, et al. T cell responses to nonstructural proteins promote cross‑serotype immunity to foot‑and‑mouth disease virus. mBio 2026;17(5):e03586‑25.