正文：铜绿假单胞菌（PA）是常见耐药病原体，易形成生物膜。噬菌体疗法作为抗生素替代策略而受到关注，多噬菌体联用可能增强疗效，但噬菌体间竞争机制尚且不明确。本研究使用PAO1、CHA、ΔretS等菌株，设计浮游/上皮细胞/生物膜三种生长状态，以及使用单/联用/顺序给药 + 美罗培南联用来探究两种烈性噬菌体（JG005 vs JG024）在不同铜绿假单胞菌（PA）生长状态下的互作，分析噬菌体竞争、耐药性演变及生物膜环境的影响。

结果：

1．浮游与上皮细胞共培养

• 单次噬菌体处理可显著降低细菌数量，但24小时后出现耐药变异。
• 在与上皮细胞共培养中，噬菌体杀菌效果与浮游状态相似，提示宿主免疫细胞可能增强噬菌体效果。

图1：噬菌体组合对不同铜绿假单胞菌生长的时间-杀伤动力学

2. 噬菌体竞争机制

• JG005 具有更短的潜伏期和更高的爆发量，编码更多tRNA，减少对宿主依赖。共感染时，JG024 的转录和复制受到抑制。
• 耐药突变主要发生在LPS合成相关基因（如 wzy、wzz），导致交叉耐药。
• 突变类型和频率因菌株基因型不同而异。

图 2：单独或联合感染铜绿假单胞菌时噬菌体的生长参数及转录特征

3 .生物膜中的噬菌体行为

• 黏附生物膜耐受性强，非黏附生物膜相对敏感但易复发。
• 噬菌体+美罗培南联用有效抑制生物膜扩散。
• 噬菌体复制和竞争行为在生物膜中表现出空间异质性。

图3：噬菌体组合对铜绿假单胞菌生物膜的时间-杀伤动力学

4．顺序给药的优化策略

• 先给予 JG024，2小时后再给予 JG005，可避免两者竞争，两者均能有效复制。
• 顺序给药在浮游和生物膜模型中均有效。

·       联用美罗培南可增强杀菌效果，但不影响噬菌体间竞争。

图4：噬菌体顺序给药和噬菌体-抗生素组合对铜绿假单胞菌的影响

结论：噬菌体间竞争、细菌生长状态和基因型共同调控噬菌体-细菌互作。优化给药顺序和联用策略可提升噬菌体疗法的效果和可持续性。

参考来源：10.1093/ismejo/wraf065