研究前沿 | 三种灵芝甲醇提取物的体外抗肿瘤作用

灵芝是一个具有重要经济价值的属，因其遗传多样性而备受关注。它是亚洲传统医学中的一味药材。此外，灵芝物种在自然生态系统中也发挥着至关重要的作用。它们是天然抗生素的丰富来源，为抵御多种病毒性疾病提供了防御机制。而且，它们还可以作为辅助药物，用于减轻癌症患者放疗和化疗的副作用。众多报告和研究已经证实了从不同灵芝物种中提取的粗提物及其分离化合物的多向生物学活性。它们已被证明具有抗菌、抗疟疾作用，并且可能还具有抗癌效果。

癌症是一组以细胞不受控制地分裂、复制永生以及抗细胞死亡为特征的疾病。所有这些情况最终都会导致形成一个被称为肿瘤的肿块。肿瘤可以是恶性的，也可以是良性的。恶性肿瘤会生长并扩散到身体的其他部位，形成所谓的转移性癌症。良性肿瘤会生长但不会扩散。乳腺癌是全球女性中最常见的癌症之一。它是一种转移性癌症，可扩散到远处的器官，如骨骼和肝脏。这些因素解释了其难以治愈的原因。原发性肝癌（也称为肝细胞癌[HCC]）。它是男性第五大常见癌症，女性第七大常见癌症。此外，它是全球癌症相关死亡的第三大原因。HCC 由慢性肝病引起，如病毒性肝炎、酗酒以及包括黄曲霉毒素和亚硝胺在内的饮食致癌物。

灵芝的子实体、菌丝体或孢子提取物含有广泛的生物活性分子。这些物质包括酚类、类固醇、氨基酸、木质素、霉素、维生素、核苷和核苷酸，其中多糖和三萜是两种主要成分。它们作为肿瘤杀灭剂、强效免疫调节剂和/或抗氧化剂。研究表明，灵芝通过抑制细胞粘附、迁移、侵袭和集落形成来抑制乳腺癌细胞的扩散。此外，灵芝还具有化学预防作用。灵芝多糖的抗癌活性仍被认为与其免疫刺激作用密切相关，其细胞毒性处于末段。因此，本研究旨在评价三种栽培灵芝甲醇提取物的体外抗肿瘤活性。研究了这些提取物对细胞周期参数、细胞凋亡程度和细胞坏死率的影响。

图1. 三种灵芝的栽培子实体；(A)红褐灵芝（Ganoderma mbrekobenum），(B)无柄灵芝（Ganoderma resinaceum）， (C)南方灵芝（Ganoderma australe）。

本研究通过评估细胞活力、细胞周期参数和细胞死亡模式，评价了三种灵芝属：无柄灵芝（Ganoderma resinaceum）、南方灵芝（Ganoderma australe）、红褐灵芝（Ganoderma mbrekobenum）子实体甲醇提取物的抗肿瘤活性。使用了磺酰罗丹明B染色和流式细胞术，以肝细胞癌（HepG2）和乳腺导管癌（T-47D）细胞系作为癌症模型，以小鼠正常肝细胞（BNL）和口腔上皮细胞（OEC）系作为相应的对照。结果表明，无柄灵芝提取物在IC50>100 µg/mL时降低了BNL的活力，但在IC50为72.32 µg/mL时未降低HepG2的活力。此外，南方灵芝和红褐灵芝在IC50分别为328.29和271.56 µg/mL时降低了OEC细胞系的活力，而在IC50分别为221.95和236.45 µg/mL时降低了T-47D的活力。三种提取物均使细胞周期停滞在G1期。无柄灵芝提取物诱导了19.99%的总凋亡（Q2+Q4），坏死率较低（Q1）。然而，用其他两种提取物处理的T-47D细胞系的总细胞坏死率分别为31.10%和18.28%，而总细胞凋亡率分别为6.83%和1.78%。因此，无柄灵芝显著抑制了HepG2细胞系的活力，而南方灵芝和红褐灵芝提取物显著降低了T-47D细胞系的活力。

这些结果可能鼓励其在进一步的体外和体内研究后用于肝细胞癌和乳腺导管癌的治疗管理。此外，与正常细胞相比，它们对肿瘤细胞的不同靶向使人们假设，使用具有双酸和热响应性的智能纳米载体靶向递送提取物（众所周知的肿瘤微环境标准）在未来将是有益的，但需要进一步的体内研究。