维生素C与黑灵芝提取物协同抗氧化、抗皱紧致功效研究

在探索皮肤衰老的深奥秘密中，科学家们逐渐揭示了自由基损伤与弹性蛋白降解在此过程中所扮演的关键角色。随着年龄增大，人体抗氧化系统的能力逐渐降低，当受到各种外部刺激如电磁辐射、强光、化学物等就会使皮肤产生大量的自由基，当自由基的量超出机体自身处理能力，便会导致氧化应激损伤，引发炎症、光老化等反应，最后加速皮肤的衰老。相关研究表明，在老年人皮肤中乳头层会消失，其中垂直的弹性纤维网络断裂成碎段状，其分布密度也在下降，说明弹性蛋白受到酶降解的情况十分严重，尤其是在光性皮肤衰老中这一现象更为明显。

维生素C（Vc）又名抗坏血酸，是水溶性维生素，在清除自由基和抗氧化方面发挥重要作用。它广泛参与机体氧化、还原等复杂代谢过程，常被作为营养强化剂、抗氧剂等添加于食品药物中。同时可以抑制黑色素产生，促进骨胶原合成，增强皮肤弹性，因而被广泛研究和应用于化妆品领域。维生素C虽然还原性很强，但极其容易被氧化且不稳定，容易受到光、热、氧的破坏分解而降低生理活性。黑灵芝作为一种传统药用真菌，其提取物被发现含有丰富的多糖和三萜类化合物，展现出了显著的抗氧化活性和抗炎功效。

结果

单独受试物和组合物对抗氧化能力的影响

Vc单独作用时和与黑灵芝提取物配成组合物时对1，1-二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH自由基）清除能力见图1。随着Vc浓度下降，单独受试物和组合物对DPPH自由基清除能力均下降，显示有剂量依赖性。同时也可看出，在相同Vc浓度下，组合物的DPPH自由基清除能力比单独Vc的效果更强，且两者具有显著性差异（P＜0.05）。

黑灵芝提取物单独作用时和与Vc配成组合物时对DPPH自由基清除能力见图2。随着黑灵芝提取物浓度下降，单独受试物对DPPH自由基清除能力下降，而组合物对DPPH自由基清除能力反而上升。与此同时，在相同黑灵芝提取物浓度下，组合物的DPPH自由基清除能力比单独黑灵芝提取物的效果更强，且两者具有显著性差异（P＜0.05）。

根据Bliss独立模型分析（见表1），Vc和黑灵芝提取物在1:125、1:500、1:2000、1:8000组合比例上存有协同作用。特别是当两者组合比例为1:2000时达时，OE与PE的差值为正数且最大，即协同作用效果最大。这一结果强调了Vc与黑灵芝提取物在特定比例下的组合使用，能够有效提高抗氧化活性，显示出显著的协同效应。

单独受试物和组合物对弹性蛋白酶抑制能力的影响

Vc单独作用时和与黑灵芝提取物配成组合物时对弹性蛋白酶的抑制能力见图3。随着Vc浓度下降，单独受试物对弹性蛋白酶抑制能力下降。由图可以看出，在相同Vc浓度下，组合物对弹性蛋白酶的抑制能力比单独Vc的效果更强，且两者具有显著性差异（P＜0.05）。

黑灵芝提取物单独作用时和与Vc配成组合物时对弹性蛋白酶的抑制能力见图4。从图4可以看出，随着黑灵芝提取物浓度下降，单独受试物对弹性蛋白酶的抑制能力下降。与此同时，当黑灵芝提取物浓度在1000mg/mL以下，相同的黑灵芝提取物浓度下，组合物对弹性蛋白酶的抑制能力要比单独黑灵芝提取物的效果更强，且两者具有显著性差异（P＜0.05）。

根据Bliss独立模型分析（见表2），Vc和黑灵芝提取物在1:14.28、1:30.85、1:66.67、1:144.06组合比例上存有协同作用。当两者组合比例为1:30.85时，OE与PE的差值为正数且最大，呈现最佳的协同作用。这表明Vc与黑灵芝提取物的组合不仅能够增强抗氧化作用，还能有效提升抗皱紧致功效，进一步证实了复合成分在抗衰老领域的应用潜力。

HPLC 测定组合物中Vc 含量

实验测试得到Vc标准曲线结果如图5所示，根据标准曲线与各组溶液所测得的峰面积数据，可计算出对应组别的Vc含量，见表3。通过HPLC对含有Vc和黑灵芝提取物的组合物进行Vc定量分析，在不同质量比下（1:100、1:250、1:500、1:1000、1:2500），组合物中Vc的实测浓度与理论浓度非常接近，表明在组合物中Vc是相对稳定的，没有与其他物质发生反应或出现加剧Vc自身分解的情况存在。由此可推测，Vc和黑灵芝提取物配成组合物后并非是消耗彼此生成新的物质产生功效作用，而是各自独立发挥影响。一定程度上验证了Bliss模型适用于本研究。

结论

在多数相同的浓度下，组合物均呈现出比单独的Vc或黑灵芝提取物具有更强的DPPH自由基的清除能力和弹性蛋白酶抑制能力，并且在特定比例组合下，具有显著的协同提升作用，如Vc和黑灵芝提取物组合比例为1:2000时具有最佳的协同抗氧化活性，两者组合比例为1:30.85则具有最佳的协同抗皱紧致效果。而通过HPLC测试可知，Vc在与黑灵芝提取物配成的组合物中是相对稳定的，并未发现Vc和黑灵芝提取物发生反应生成新的物质，据此推测两者发挥功效作用由各自独立发挥作用。

参考资料：

[1]徐文枫,牛强,徐闪浪,等. 维生素C与黑灵芝提取物协同抗氧化、抗皱紧致功效研究[A].科技广场,2024:57-61.