Janus激酶抑制调节戊型肝炎病毒感染

　　戊型肝炎病毒(HEV)通常会导致自限性疾病，但尤其是免疫功能低下的个体有发展为慢性和严重感染病程的风险。Janus激酶(JAK)抑制剂(JAKi)是治疗自身免疫性炎症性风湿病(AIRD)的新型药物。由于JAK在先天免疫中起关键作用，因此在AIRD患者的JAKi治疗期间经常报告病毒感染和再激活。2023年发表在《Antiviral Research》上的《Janus kinase-inhibition modulates hepatitis E virus infection》一文旨在通过感染原代人肝细胞(PHH)，然后对病毒标志物进行免疫荧光染色和转录组分析，表征JAKis对HEV复制的影响。

　　研究期间，一名53岁的类风湿性关节炎(RA)女性患者因常规血液检查诊断出肝酶升高而前往风湿病学家处就诊，以进行诊断性评估(图1)。就诊时，病人没有报告任何症状。类风湿性关节炎的炎症活动受到抑制。诊断性检查显示抗HEV IgM和IgG抗体，HEV病毒载量为7000 IU/mL。

　　图1指标患者的临床病程。

　　显微镜分析显示，所有四种JAKi在HEV感染的PHH中都导致更强的荧光信号强度，而用作阳性对照的鸟苷类似物利巴韦林降低了ORF2荧光信号强度(图2A)。与此一致，对后代病毒的定量显示，与HEV感染、未经处理的PHHs相比，滴度增加，尤其是巴瑞替尼导致滴度增加约40倍(图2B)。巴瑞替尼治疗以剂量依赖性方式促进 HEV 传播 3、5 和 7 dpi(图 2C)。单一治疗证实，IFN限制和巴瑞替尼促进了HEV后代病毒的产生(图2D和E)。检测到利巴韦林在存在和不存在巴瑞替尼的情况下显着限制了 HEV 感染和后代病毒的产生(图 2F)。这些数据证实了利巴韦林在所用细胞培养模型中抑制JAK-STAT信号转导的抗病毒作用。

　　图2 JAKis促进HEV感染人原代肝细胞并产生子代病毒。

　　在巴瑞替尼存在的情况下，映射到病毒参考基因组Kernow-C1 p6(GenBank登录号)的reads数量。 JQ679013)与未经处理的样品相比，高出约16倍(0.2μM)和34倍(2μM)(图3)。

　　图3 HEV感染的PHHs的RNAseq揭示了在巴瑞替尼治疗后HEV RNA在原代人肝细胞中的复制增加。

　　这些分析已经表明，特别是巴瑞替尼治疗和戊型肝炎病毒感染导致了不同的整体基因表达谱(图4A)。此外，我们观察到在所有测试条件下，大量基因失调(每千碱基百万 [RPKM] 读数≥ 0.5 和倍数变化 ≥2)，表明 HEV 感染和巴瑞替尼治疗都会影响 PHH 的转录组(图 4B)。接下来，我们评估了单个GO项的调节，并检测了在巴瑞替尼和/或HEV感染存在下“抑制I型IFN信号传导”、“对病毒的反应”和“对细胞因子的反应”(图4C)。

　　图4 巴瑞替尼在人原代肝细胞中调节HEV触发的转录反应。

　　在这里，特别是STAT1和IRF9(干扰素调节因子9)的表达降低，这是介导对病毒抗性的两种不可或缺的成分(图5A和B)。我们观察到2 μM巴瑞替尼可以完全抑制HEV触发的ISG表达上调，而0.2μM巴瑞替尼抑制上调(即IFITM1(干扰素诱导的跨膜蛋白1))。对于ISGs的一个子集，巴瑞替尼不影响HEV引起的基因表达诱导(即RSAD2(自由基S-腺苷甲硫氨酸结构域蛋白2))(图5B-C)。这些数据表明，在HEV感染的背景下，JAK-STAT通路的表达及其对不同ISG亚群的调节具有不同的相关性。

　　图5 巴瑞替尼抑制了HEV诱导的PHH中ISG的表达。

　　综上所述，该文章评估了JAKi疗法对HEV感染的影响。离体分析显示，在巴瑞替尼存在的情况下，HEV复制急剧增加。虽然目前尚不清楚巴瑞替尼是否在报告的病例中促进了HEV感染，并且适应性免疫在体内控制HEV的作用仍有待确定，但鉴于先天免疫是通过JAK-STAT信号传导协调的，研究结果引起了潜在的关注。因此，应考虑向患者介绍戊型肝炎病毒传播的危险因素，并制定合理的安全措施。

　　参考文献：

　　Kinast V, Andreica I, Ahrenstorf G, et al. Janus kinase-inhibition modulates hepatitis E virus infection. Antiviral Res. 2023;217:105690.