香港猫和狗中的大鼠戊型肝炎病毒

戊型肝炎是人类病毒性肝炎的重要原因，全球每年估计有2000万例病例。引起人类感染的戊型肝炎病毒(HEV)变种属于肝炎病毒科的两个物种：巴拉亚尼肝炎病毒 (bHEV) 和鼠型肝炎病毒 (rHEV) 由于与bHEV存在相当大的系统发育差异，rHEV被认为无法感染人类。然而，2018年，在香港报告了全球首例人类rHEV感染病例。猫和狗是常见的城市动物，可能会与街头老鼠或其粪便发生相互作用。猫和狗容易感染其他啮齿动物传播的疾病，如鼠疫和钩端螺旋体病。此外，肝炎病毒科内的病毒经常表现出种间传播。尽管猫和狗从未被证明具有活跃的HEV感染，但许多血清学研究表明它们携带抗HEV抗体。2024年发表在《Emerg Microbes Infect》上的《Rat hepatitis E virus (Rocahepevirus ratti) exposure in cats and dogs, Hong Kong》一文通过使用特定的定量实时逆转录 PCR (RT-qPCR)测定和酶免疫测定(EIA)系统来探测猫和狗中的bHEV和rHEV血清阳性率，调查猫和狗对rHEV感染的血清反应性，并测量这些动物中物种特异性HEV暴露率。

HEV-A4-P239 和 HEV-C1-P241 肽分别是bHEV和rHEV的ORF2衣壳​​蛋白的同源截短片段。这些片段包含 HEV 最重要的抗体表位，并自组装成病毒样颗粒，改善构象抗原呈递。为了使用狗或猫血清基质研究这些EIA的性能，我们将从bHEV和rHEV阳性患者血浆中分离出的连续稀释的IgG加入到10份狗或猫血清池中，这些血清在bHEV和rHEV的初步评估中产生了接近空白水平的OD。rHEV环境影响评估。然后在bHEV和rHEV EIA中测试加标样品。当用同源EIA测试加标样品时，观察到升高的OD具有良好的线性。

图1 HEV-A4-P239 和 HEV-C1-P241 肽的特征。

在bHEV和 rHEV EIA 板中平行测试伴侣动物血清。在任一或两个EIA中，13/751狗血清的OD值超过了整个队列的平均值。如图2(B)所示，5/130猫血清的OD超过临界值，这些样本的OD值范围bHEV EIA中为0.8677至1.938，rHEV EIA中为0.8677–1.2635。

图2 在bHEV和rHEV EIA 中测试的(A)狗和(B)猫血清样品的OD值。

然后使用经过修改的Wantai试剂盒方案对bHEV或rHEV EIA测试呈阳性的血清样本进行测试。该试剂盒使用基于bHEV基因型1 ORF2（pE2区域）的重组抗原。bHEV和rHEV EIA测试呈阴性的样品在Wantai试剂盒中产生低OD值。对于bHEV EIA（rHEV EIA+或rHEVEIA-）测试呈阳性的伴侣犬样本，6/8产生的信号超过截止值。然而，仅在rHEV EIA中检测呈阳性的五个样本(bHEV EIA-)中只有一个在Wantai测定中产生了阳性信号。三个伴侣猫样本（包括rHEV反应样本）在Wantai检测中给出了阳性结果）。

图3 Wantai测定中bHEV和rHEV EIA阳性伴侣(A)狗和(B)猫血清的光密度(OD)值。

为了进一步确认rHEV EIA结果的特异性，在基于HEV-C1-P241的免疫印迹中评估了rHEV EIA检测呈阳性的所有11个猫或狗样本（bHEVEIA+或bHEVEIA-）。如图4所示，所有样品均产生条带，证实动物血清和HEV-C1-P241肽之间存在特异性相互作用。

图4 rHEV EIA阳性伴侣动物血清样本的HEV-C1-P241免疫印迹。

综上所述，这项研究证明狗和猫具有针对rHEV或相关抗原的反应性抗体。需要进一步的研究来确认狗和猫对rHEV的易感性。鉴于rHEV在人类健康中的新兴作用，这具有公共卫生意义。

参考文献：[1] Shun EH, Situ J, Tsoi JY, et al. Rat hepatitis E virus (Rocahepevirus ratti) exposure in cats and dogs, Hong Kong. Emerg Microbes Infect. 2024;13(1):2337671.