环介导等温扩增技术检测肉与肉制品中食源性致病菌

肉与肉制品为人类饮食提供了优质蛋白质、维生素和其他营养物质，但其营养丰富的特性也为食源性病原微生物的繁殖提供了理想环境，进而可能导致严重的经济损失和健康风险。其中常见的食源性致病菌主要包括：单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7等。这四种食源性致病菌可快速引发感染，对公众健康构成重大威胁，甚至带来巨大的经济损失。因此，开发快速、灵敏且准确的食源性致病菌检测方法是确保食品安全的关键策略之一。

研究思路

开发了基于LAMP技术快速检测单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的方法。通过系统优化实验条件，建立了针对四种致病菌的高效检测体系，并验证了方法的特异性和灵敏度。通过对52份肉类样本的实际检测，进一步证实了该方法的准确性，为肉类食品中食源性致病菌的快速检测提供了可靠的技术参考。

LAMP检测体系的特异性验证

针对单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7的检测体系均表现出高特异性：仅目标菌样本呈现天蓝色（阳性）并显示特征性扩增条带，其余15种非目标菌及阴性对照均保持紫色（阴性）且无扩增产物，证实这三种检测方法可在种水平实现精确鉴别。在沙门氏菌检测中，肠沙门氏菌和邦戈沙门氏菌均呈阳性反应，表明该检测体系具有属水平特异性。

LAMP检测体系的灵敏度验证

本研究构建了8个浓度梯度的样本，通过LAMP与PCR同步检测确定各致病菌的最低检测限。结果显示，LAMP方法对单增李斯特菌的检测限为1.8 × 10¹ CFU/mL，金黄色葡萄球菌为5.1 × 10¹ CFU/mL，肠沙门氏菌为1.2 × 10¹ CFU/mL，大肠杆菌O157:H7为3.3 × 10³ CFU/mL。与传统PCR方法相比，LAMP检测灵敏度显著提升：对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的检测灵敏度提高100倍，对肠沙门氏菌提高1000倍，对大肠杆菌O157:H7提高10倍。值得注意的是，本方法对单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和肠沙门氏菌的检测灵敏度与现有文献报道的LAMP技术相当，进一步验证了该方法的灵敏度优势。

展望

本研究成功建立了针对单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、肠沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的LAMP快速检测方法，整个检测过程可在60 min内完成。通过16种致病菌的交叉反应测试，该方法仅对目标菌株发生显色反应，显示出高特异性。与传统PCR方法相比，该检测体系对四种食源性致病菌的灵敏度提高了10-1000倍。通过创新性地引入羟基萘酚蓝（HNB）显色剂，实现了无需专业仪器的可视化检测，为基层食品安全监管提供了便捷的现场检测手段。在52份肉类样品的实际检测中，该方法的准确率达到100%，充分验证了其可靠性和在食品安全监测中的重要应用潜力。

参考文献：

Xin Li, Mingxue Zhu, Siyuan Wang, Weijia Li, Baohong Ren, Lingbo Qu*, Xiaoling Zhang*. Loop-Mediated Isothermal Amplification for Detecting Four Major Foodborne Pathogens in Meat and Meat Products. Foods. Doi: 10.3390/foods14132321.