食源性病毒检测方法：当前技术水平和未来展望

　　导读：这篇文献是关于食源性病毒检测方法的综述，主要讨论了当前食源性病毒检测的现状和未来展望。文章提到了各种食源性病毒检测方法，包括基于CRISPR/Cas的生物传感技术、实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫层析技术等。此外，还探讨了未来食源性病毒检测领域的发展方向，包括加强基础研究、大规模筛查技术、多重检测方法、非靶向检测、资源有限地区的检测方法、以及与区块链、物联网、大数据等新兴技术的整合。最终，文章指出理想的食源性病毒检测策略应该平衡快速性、敏感性、特异性、可用性、多样性、智能性和便利性。文章认为随着科技的不断发展，食源性病毒检测能力将得到显著提高，从而更好地保障食品安全。

　　食源性病毒检测方法

　　食源性病毒检测方法包括传统的电子显微镜和培养分离、分子技术、生物传感器以及新兴的CRISPR/Cas基于检测技术(见图1)。传统的电子显微镜和培养分离方法虽然具有一定的可靠性，但耗时且需要专业设备和技能。而分子技术和生物传感器则具有更高的灵敏度和特异性，但也存在一定的挑战。新兴的CRISPR/Cas技术结合等温扩增技术，具有快速、灵敏和特异的核酸检测能力，被认为是未来病原体检测的领导者。综合不同技术的新型检测方法将进一步改善检测性能，并拓宽检测范围。

　　图1 食源性病毒检测常用方法概述

　　CRISPR/Cas技术在食源性病毒检测中

　　CRISPR/Cas技术在食源性病毒检测中具有多种优势(见图2)。首先，它具有高灵敏度、高特异性、可编程性、模块化和低成本的特点，这些优势打破了传统分子诊断的瓶颈，使其成为新一代病原体检测方法的领导者。其次，CRISPR/Cas技术能够进行多重检测，克服了传统方法中的序列限制、污染和低背景检测等问题。此外，CRISPR/Cas技术还可以通过与不同的传感方法结合，如色谱法、表面增强拉曼光谱法、电化学等，拓展了其应用范围。总的来说，CRISPR/Cas技术在食源性病毒检测中具有突出的优势，将推动食品安全领域的发展，并为食品安全提供坚实的保障。

　　图2. 基于 CRISPR/Cas 的食源性病毒检测。 (A) 基于 CRISPR/Cas 的生物传感技术概述。 (B) RT-RPA-Cas12a 检测人类诺如病毒的策略。(C) 使用 Cas13 进行大规模多重核酸检测

　　未来食源性病毒检测领域的发展趋势包括以下几个方面：首先，需要加强食源性病毒的基础研究，例如食源性病毒与食品基质之间的相互作用、病毒在食品中的生物行为等，这将为它们的检测提供宝贵的信息。其次，需要发展大规模筛查技术，以便对偶发的病毒感染事件进行大规模检测，这对于类似于冷链食品中的SARS-CoV-2的检测至关重要。第三，目前大多数方法都是针对单一类型的病毒进行检测，因此需要开发多重检测方法，能够同时检测多种食源性病毒或者食源性病毒和其他病原微生物(细菌等)。此外，还需要发展针对低收入和中等收入国家或资源有限地区的检测方法，结合小型、自动化和低成本设备。最后，需要将已建立的方法与新兴技术(如区块链、物联网、大数据、云计算等)相结合，使检测变得更加智能和用户友好。同时，需要强调实验室研究的“转化”过程，并鼓励更多面向应用的基础研究。总的来说，未来食源性病毒检测领域的发展趋势是朝着快速、敏感、特异、可用性强、多样性、智能和便捷的检测策略方向发展。随着科学技术的不断发展，我们相信当前的挑战将在不久的将来得到克服，食源性病毒检测能力将得到大幅提升，从而更好地保障食品安全。

　　参考文献：Wales S Q, Pandiscia A, Kulka M, et al. Challenges for estimating human norovirus infectivity by viability RT-qPCR as compared to replication in human intestinal enteroids[J]. International journal of food microbiology, 2024. 411: 110507.