“细菌侦探”出动:高效检测三大病原菌
9月29日,最高人民法院发布涉产品质量典型案例,包括谢某生产、销售不符合安全标准的食品案获刑1年的案例。谢某因烤鸭店食品滋生细菌及食材过期,导致多人食物中毒。经检验,在当天抽检的 40 份单品中,11批次凉菜检测出“大肠菌群”“金黄色葡萄球菌”,17 批次“金黄色萄球菌”超出标准限值,鸡翅、烤鸭亚硝酸盐严重超标。
食物中的细菌污染一直是一个让人头疼的食品安全问题。别看这些细菌个头小,但它们可是能引起严重食物中毒的“坏家伙”。为了对抗这些“隐形敌人”,科学家们可是绞尽脑汁,想出了各种办法。今天,我们就来看看一项最新的研究,看看科学家们是如何用一种高效、灵敏的检测方法来同时检测燕窝、阿胶和枸杞中的三种常见细菌——沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的。
这项研究的主要目的是开发一种高效、灵敏、特异性强且操作简单的多重实时定量PCR(mRT-qPCR)方法,用于同时检测燕窝、阿胶和枸杞中的活沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。研究人员设计了针对目标基因invA、uidA和nuc的引物和探针,并通过丙啶单叠氮化物(PMA)处理排除死细菌的遗传物质,从而只检测活细菌。
研究方法
研究人员选用了几种不同的食品样本,包括燕窝、阿胶和枸杞。实验分为几个步骤:首先,研究人员将食品样本进行均质化处理,然后加入适量的细菌悬浮液,模拟实际污染情况;接着,样本经过PMA处理,以排除死细菌的遗传物质;再然后,研究人员从处理后的样本中提取DNA,确保只提取到活细菌的DNA;最后,研究人员设计了针对沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的特异性引物和探针,通过mRT-qPCR方法,研究人员能够同时检测这三种细菌的存在,并且能够区分活细菌和死细菌。
研究结论
经过多次试验,研究人员得出了以下结论:
1、高效性:这种方法能够在短时间内同时检测出三种细菌,检测效率高;
2、灵敏性:这种方法能够检测到低至10^2 CFU/ml的沙门氏菌和大肠杆菌,以及10^1 CFU/ml的金黄色葡萄球菌;
3、特异性:这种方法能够特异性地检测目标细菌,不会受到其他非目标细菌的干扰;
4、可靠性:通过PMA处理,这种方法能够可靠地区分活细菌和死细菌,回收率在95.7%到105.6%之间。
这项研究表明,PMA结合mRT-qPCR技术是一种高效、灵敏、特异性强且操作简单的方法,适用于同时检测食品中的多种病原菌。未来,科学家们可以继续优化这种方法,进一步提高其检测效率和灵敏度。此外,这种方法还可以应用于其他食品和药品的微生物检测,为食品安全提供更有力的保障。
参考文献:Liang, Taobo,Long, Hui,Zhan, Zhongxu,et al.Simultaneous detection of viable Salmonella spp., Escherichia coli, and Staphylococcus aureus in bird's nest, donkey-hide gelatin, and wolfberry using PMA with multiplex real-time quantitative PCR[J].FOOD SCIENCE & NUTRITION,2022,10(9):3165-3174.
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