牛粪里挖出的“抑菌高手”：产菌粪肠球菌CAUM157通过安全关，李斯特菌见它就让道

研究背景

肠球菌既是天然肠道居民，又因耐万古霉素(VRE)被贴上“医院警报”标签。欧盟EFSA和英国ACNFP强调：能否成为益生菌，必须“一株一议”。韩国生牛奶中分离的CAUM157（KACC81148BP）早被证实产双肽细菌素，对李斯特菌有强抑制，但其体内安全性、耐胃酸能力及耐药基因背景一直缺报告，限制了饲料或食品应用。

研究内容

中央大学团队用MiSeq完成全基因组测序（NCBI登录号GCA_014805465.1），并与7株公共菌（含致病参考V583）比较，重点回答四问：

1. 有无临床关键耐药基因？

2. 毒力因子是否“可接受”？

3. 能否活着过胃？

4. 细菌素抑菌谱有多宽？

实验流程

l  生信：BRIG画环状比较图；ResFinder、CARD、VFDB、PathogenFinder搜耐药与毒力基因；IslandViewer找基因组岛；MLST 2.0定序列型。

l  药敏：CLSI微量肉汤稀释，测8类抗生素MIC。

l  体外耐受：人工胃液(pH 2.0/3.0)孵2 h；0.3%/0.5%猪胆汁MRS 24 h；测存活率。

l  功能：API 50CH看糖发酵；沉淀法测胆盐水解酶(BSH)；比浊法测自聚与共聚（与李斯特菌ATCC 19111/19114/19115）。

l  抗菌：纯化细菌素M157A/B，点种法测对革兰阳/阴性菌的MIC。

关键结果

1. 基因档案

MLST为ST21，人群来源，无vanA/vanB/vanC2；万古霉素MIC 4 μg/mL（敏感），氨苄西林MIC 1 μg/mL（敏感）。

发现氨基糖苷类、大环内酯、四环素等耐药基因，均位于10个基因组岛内；未检出溶细胞素(cyl)操纵子。

与V583共有的“黏附-抗吞噬-生物膜”基因视为“生态位因子”，非致病专属。

2. 耐胃数据

pH 3.0人工胃液2 h存活100.7%；pH 2.0 30 min后降至97%，2 h后失活，提示可安全通过大部分胃时段。

0.3%胆汁24 h存活104%；0.5%胆汁6 h略降，24 h仍>90%，BSH 10 min内产生白色沉淀，双基因CM157_00494/02577负责脱结合。

3. 聚集与拮抗

自聚率70.8%，显著高于三株李斯特菌（31–47%）。

与李斯特菌共聚48–54%，可物理阻挡病原黏附。

细菌素对L. monocytogenes MIC 0.2–0.4 μg/mL；对产气荚膜梭菌、变异链球菌、金黄色葡萄球菌MIC 2–20 μg/mL；对革兰阴性菌基本无效。

结论与评价

耐药基因虽多，但缺“最后防线”万古霉素，ST21背景清晰，可纳入“可监控”名单。

耐胃酸、耐胆汁、自聚/共聚/产细菌素“三板斧”齐全，满足ISAPP对益生菌“到得了、站得稳、起作用”的核心要求。

作者强调：毒力标签应改为“生态位因子”，关键看菌株是否具备“无害环境+可控应用”；CAUM157在饲料、青贮、口腔护理领域具备替代抗生素潜力，但需继续完成动物体内试验与耐药基因转移监测。

参考文献：1、Elnar, Arxel G, and Geun-Bae Kim. “Probiotic potential and safety assessment of bacteriocinogenic Enterococcus faecalis CAUM157.” Frontiers in microbiology vol. 16 1563444. 1 Jul. 2025, doi:10.3389/fmicb.2025.1563444