荧光标记ATP类似物用于直接监测泛素激活

简单、可靠、高效、实时监测酶促ATP裂解的方法很少。为了解决这个问题，研究人员开发了新型荧光标记的三磷酸腺苷、四磷酸腺苷和五磷酸腺苷(ATP)类似物。这些ATP类似物与先前的报道不同：在末端磷酸基团上只有一个单一的吖啶酮基染料。染料的荧光被ATP类似物的腺嘌呤残基淬灭；在磷酸链断裂和染料从腺苷部分解离后，荧光恢复，从而可以实时跟踪ATP切割酶的活性。研究人员证明了泛素激活酶UBA1和UBA6对泛素激活的能力。研究人员发现，作为辅助因子的UBA1/UBA6的效率很大程度上取决于ATP类似物磷酸链的长度：三磷酸的加工效率大于五磷酸。值得注意的是，这种新型的含五磷酸盐的ATP类似物取代了先前报道的双染料标记类似物，因此具有广泛的应用前景。基于这些新型荧光标记ATP类似物，研究人员发现了两种人类E1s。

参考文献：https://doi.org/10.1002 / chem.202001091