新型荧光传感器阵列:开启细菌检测的 “高速时代”

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来源:徐礼龙
2025-03-07 08:13:08
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核心提示:合肥工业大学研发出用功能化石墨烯量子点的荧光传感器阵列,结合机器学习,5 分钟内可快速精准检测 5 种细菌,在多场景表现优异,突破传统检测局限。

细菌在自然界广泛存在,严重威胁人类健康,每年约 770 万人因细菌感染死亡,占全球总死亡人数 13.6%,是第二大死因,食源性疾病、医院感染等都与之相关。快速精准检测细菌对疾病防控和保障公众健康意义重大。但传统检测方法都有缺陷:细菌培养虽准确,却操作复杂、耗时久;核酸检测灵敏快速,但对人员和设备要求高、成本高且结果可能不准;免疫检测操作简单、特异性强,可样本制备难、检测时间长;SERS 和 MS 检测精度高,不过设备昂贵、依赖数据库,普及和使用不便。

 近日,合肥工业大学在ACS Applied Materials & Interfaces期刊上发表了题为 :Machine Learning-Enhanced Bacteria Detection Using a Fluorescent Sensor Array with Functionalized Graphene Quantum Dots论文。

此次科研团队研发的荧光传感器阵列,核心材料是氮和硫掺杂的石墨烯量子点(NS - GQDs)。NS - GQDs 通过简单的一锅水热法合成,这种方法绿色环保,避免了使用有毒金属元素。研究人员进一步用大观霉素、卡那霉素和多粘菌素 B 对 NS - GQDs 进行功能化修饰,分别得到 S - NS - GQDs、K - NS - GQDs 和 B - NS - GQDs。这些功能化的量子点与不同细菌的结合能力存在差异,一旦与细菌结合,其荧光强度会显著降低。由于不同细菌表面的电子特性和组成不同,它们与带有不同表面电荷的功能化 NS - GQDs 相互作用方式各异,导致荧光猝灭程度不同,从而形成独特的荧光响应模式,为细菌识别提供了依据。

 

图 1:通过相对荧光信号变化等,评估三种 NS-GQDs 与细菌的作用,展示机器学习算法识别细菌的效率及相关分析图。

在实验过程中,研究人员挑选了大肠杆菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌这 5 种具有代表性的细菌作为研究对象。实验时,将 500μL 浓度为 0.33mg/mL 的量子点溶液与 500μL 细菌溶液充分混合,在 37°C 环境下孵育 5 分钟,确保量子点与细菌充分相互作用,随后测量混合溶液的荧光强度。通过对比混合前后荧光强度的变化,用(F₀ - F)/F₀的比值构建训练矩阵,为后续数据分析提供基础。为了从复杂的荧光数据中提取有效信息,实现精准的细菌识别,研究团队采用了线性判别分析(LDA)、朴素贝叶斯、K 近邻(KNN)、决策树和支持向量机(SVM)等多种机器学习算法。

 

图 2:利用荧光阵列对单一细菌进行识别,通过多种图展示 5 种细菌的区分情况和特征。

 

图 3:以大肠杆菌为例,展示荧光阵列对不同浓度细菌的识别,呈现相关图表分析浓度关系。

实验结果显示,该荧光传感器阵列表现卓越。检测速度方面,仅需 5 分钟即可完成检测,大大缩短了检测周期;检测精度上,对 5 种细菌的识别准确率高达 100%,即使在细菌浓度低至 1.0×10³CFU/mL 的情况下,依然能够精准区分。不仅如此,该阵列还具备出色的定量分析能力,传感器信号与细菌浓度呈现良好的线性关系,为准确判断细菌数量提供了有力支持。在检测细菌混合物时,无论是两种细菌的混合样本,还是包含多种细菌的复杂样本,该阵列都能有效识别,展现出强大的检测能力。

4:运用荧光阵列对混合细菌进行识别,通过典型得分图展示区分不同混合菌的情况。

 

图 5:测试荧光平台的抗干扰性和稳定性,呈现区分细菌与干扰物、重复测量及存储时间的相关结果。

在实际应用场景中,该传感器阵列同样表现出色。研究人员模拟现实情况,在经过灭菌处理的自来水中引入 5 种细菌模拟污染场景,同时在牛奶样本中接种目标细菌并培养至特定浓度进行检测。结果表明,该平台能够准确识别自来水中的 16 种未知细菌样本以及牛奶中的细菌,充分验证了其在实际样品检测中的可靠性和实用性。此外,该传感器阵列的抗干扰能力强,能有效区分检测过程中可能遇到的如 Na⁺、K⁺、Cl⁻、NO₃⁻、葡萄糖、半乳糖、精氨酸和赖氨酸等干扰物质;重复性和稳定性佳,连续测量 20 次荧光强度衰减极小,在储存 15 天后,荧光信号依然稳定,确保了检测结果的可靠性。

 

图 6:使用荧光传感器阵列识别 PBS 中未知细菌,展示区分不同类型未知细菌样本的典型得分图。

 

图 7:利用荧光传感器阵列识别自来水和牛奶中的真实细菌,呈现区分单菌和目标菌的典型得分图。

这项研究成果为细菌检测领域带来了新的曙光,在食品安全监测、临床诊断、疾病防控等诸多领域具有广阔的应用前景,有望成为保障公众健康和公共卫生安全的有力武器,推动相关领域的技术革新和发展。

参考文献:

[1]Zhang X, Zhu W W, Mei L H, et al. Machine Learning-Enhanced Bacteria Detection Using a Fluorescent Sensor Array with Functionalized Graphene Quantum Dots[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2025.

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