奶中捉菌新科技：CRISPR试纸条60分钟“秒杀”牛奶超级细菌MRSA

随着全球范围内食源性疾病的持续高发，特别是由微生物引起的食品安全问题，对公共卫生构成了重大威胁。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）作为一种重要的食源性病原体，因其高度的抗生素耐药性而增加了感染风险。因此，开发快速、准确的MRSA检测方法对于保障食品安全至关重要。

近日，中国科学院苏州生物医学工程技术研究所的研究团队在《Food Control》杂志上发表了一项突破性研究成果。他们开发了一种基于RPA-Cas12a-LFS方法的直接视觉检测技术，能够在60分钟内从牛奶样品中直接、准确地检测到低至10 CFU/mL的MRSA。这一创新方法不但提高了检测灵敏度，还大大简化了实验程序，降低了交叉污染的风险，适用于现场和实时监测。

现有的MRSA检测方法存在诸多挑战，比如操作复杂、依赖昂贵设备、检测成本高和耗时长等问题，不适合现场和实时监测。RPA-Cas12a-LFS方法通过整合细菌裂解、RPA核酸扩增和CRISPR-Cas12a核酸检测为一步反应，并结合基于链霉亲和素-金纳米粒子（SA-AuNP）的CRISPR特异性侧流试纸条（LFS），无需核酸提取，简化了实验程序，降低了交叉污染风险。

研究团队详细描述了crRNA和RPA引物的设计、细菌基因组DNA的提取、RPA-Cas12a检测系统的建立、LFS的制备和检测流程。通过实验验证，该方法在牛奶样品中检测MRSA的限低至10 CFU/mL，60分钟内完成检测。对多种细菌菌株进行测试，显示出对MRSA的高特异性，无交叉反应。此外，该方法在多种食品样品中成功检测到MRSA，证明了其实际应用中的可行性。与传统的培养法和分子生物学方法相比，RPA-Cas12a-LFS方法具有更高的灵敏度、特异性和更短的检测时间，且设备要求低。不过该方法对低pH样品（如橙汁）的检测效果不佳，需进一步优化。

RPA-Cas12a-LFS方法为食品工业中的MRSA检测提供了一种快速、准确且成本效益高的解决方案。未来可通过优化pH缓冲体系和集成便携式荧光读取器，进一步提高方法的适用性和检测效率。这项研究成果为食品安全监测提供了新的技术手段，通过集成CRISPR-Cas12a的高特异性和LFS的便捷性，实现了现场和实时的病原体监测，有助于提升全球食品安全水平。此外，该方法的应用前景不仅限于食品行业，还可以在医疗、环境监测等多个领域发挥重要作用，为公共卫生安全提供有力保障。

 参考文献：

Yixiang Sun, Liren Zhang, Huimin Wu, Hongjun Chen, Huijie Hu, Chongyu Zhang, Xiaoqiang Li, Yuan Li, Yimai Wang, Liqiang Luo, Yizhi Song,Direct visual detection for methicillin-resistant Staphylococcus aureus in milk based on the RPA-Cas12a-LFS method,Food Control,Volume 173,2025,111209,ISSN 0956-7135,https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2025.111209.