65GHz 介电泳 - LC 振荡器阵列芯片:饮料细菌无标记紧凑检测技术

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来源:徐礼龙
2025-06-06 10:40:22
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核心提示:京都大学研究团队在《Food Bioscience》发表成果,开发出基于介电泳(DEP)集成 65GHz 电感电容(LC)振荡器阵列传感器芯片的无标记细菌检测技术,为饮料微生物快速检测提供新方案。

食品中细菌污染严重威胁公众健康,据世界卫生组织报告,每年约有 6 亿例食源性疾病发生。饮料因成分多样、消费广泛,细菌易在其中快速增殖,如大肠杆菌、沙门氏菌等,给食品安全带来极大隐患,因此快速、准确检测饮料中的细菌至关重要。

这款传感器芯片采用 65nm CMOS 工艺制造,在 3×3 平方毫米的检测区域内,以之字形排列了 1488 个传感器元件。每个元件均集成了 5 微米的介电泳电极和 50 微米的 LC 振荡器。介电泳电极通过施加非均匀电场产生介电泳力,基于微生物与基质的介电特性差异,实现对目标细菌的定向捕获。具体而言,当电场频率使得克劳修斯 - 莫索蒂因子(CM 因子)为正时,正介电泳力(p-DEP)会将细菌吸引至高电场密度区域,如电极尖端附近。而 LC 振荡器工作在 65GHz 的谐振频率,其输出频率会随样本介电常数的变化而发生偏移。当细菌存在时,会替代电极表面的 Bulk 水体积,导致介电常数降低,进而使谐振频率升高,通过对这一频率偏移量的检测,即可实现对细菌数量的定量分析。这一频率设计能够有效减少结合水的干扰,直接反映菌体体积的变化,从而实现无标记检测。

1:展示传感器芯片的微观结构、介电泳电极电场分布、LC 振荡器等效电路及实验装置,呈现芯片设计原理与检测流程。

2:通过传感器元件输出矩阵、显微镜图像及频率变化曲线,显示细菌随时间的捕获分布与动态过程。

研究团队针对大肠杆菌和酿酒酵母,对传感器的介电泳收集模式进行了评估,并优化了其在矿泉水、绿茶、牛乳等不同饮料基质中的检测条件。实验结果表明,在矿泉水和绿茶中,该传感器对大肠杆菌的检测限可达 1.3×10⁵个细胞 / 毫升;对于电导率较高的牛乳,通过 10 倍蒸馏水稀释,将电导率降低至适宜范围后,检测限为 5.4×10⁶个细胞 / 毫升,且富集效率最高可达 20 倍。值得一提的是,整个检测过程无需进行预处理,也无需使用外部分析仪或温度控制设备,仅需 30 分钟即可完成。此外,实验还发现,传感器对不同尺寸的微生物(如大肠杆菌和酵母)的捕获模式存在差异,这为微生物的尺寸区分提供了潜在的技术路径。

3:对比不同介电泳电压、流速下的细菌捕获效率及分布差异,优化检测条件。

与传统的细菌检测方法相比,该技术具有显著的优势。传统的平板培养法需要数天时间才能完成菌落计数和细菌浓度定量;而聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)等分子技术,虽然能在数小时内实现精确检测,但依赖复杂的设备和专业技术人员,成本较高,难以满足食品行业日常检测的需求。新开发的技术通过将介电泳与 LC 振荡器集成设计,利用非均匀电场实现细菌的分离和富集,并结合高频振荡信号的变化实现无标记检测,成功避免了传统方法耗时、设备依赖等问题。此外,芯片的紧凑设计使其便于集成到便携式设备中,在大规模生产后,单芯片成本可降至约 2 美元,且具备可重复使用性,极大地降低了检测成本。

4:计算并验证不同饮料基质中介电泳力(CM 因子)随频率的变化,指导频率选择。

研究还深入分析了介电泳电压、流速对细菌捕获效率的影响。提高电压可以增强介电泳力,从而提升细菌的捕获量;但流速过高时,流体阻力会抵消介电泳力,导致捕获效率下降。例如,在 20Vpp 的电压下,即使流速达到 50μL/min,仍能有效捕获大肠杆菌,而在 5Vpp 电压下,当流速超过 20μL/min 时,捕获量则显著减少。不同饮料基质的电导率差异直接影响介电泳频率的选择:低电导率的矿泉水在 2MHz 时介电泳力最强,中等电导率的绿茶优化频率为 5MHz,高电导率的牛乳则需稀释后在 5MHz 下进行检测,这体现了该技术对不同基质的良好适应性。

参考文献:Chen S, Yamashige Y, Kondo N, et al. Label-free and compact approach for bacterial detection in beverages using a dielectrophoresis-integrated 65-GHz inductor-capacitor-oscillator array sensor chip1[J]. Food Bioscience, 2025: 106803.

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