三管多重qPCR实现9种急性呼吸道感染病原的快速诊断

  急性呼吸道感染病原的快速筛查诊断对缓解病情和避免病情传播、流行至关重要。为此，Xi-Wen Jiang等人开发了三管多重RT-qPCR的诊断方法，应用于9种呼吸道病原的检测，其研究成果于2022年发表在Scientifc Reports上。

  急性呼吸道感染是对全球公共卫生最严重的威胁之一，是儿童和免疫功能低下成人发病和死亡的一个重要原因。急性呼吸道感染是由多种致病原感染引起的传染病，包括病毒、细菌和支原体等，这种感染病原的多样性和复杂性增加了诊断的多样性，使得治疗策略复杂化。因而，为使临床作出适当的治疗决策，发展一种快速、有效、准确的病原筛查诊断方法至关重要。

  为此，Xi-Wen Jiang等人开发了一种多重RT-qPCR系统，该系统可以在3个离心管中实现9种急性呼吸道感染病原的检测，包括：甲型流感病毒(Influenza A);B型流感病毒(Infuenza virus B);腺病毒(Adenovirus);呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus, RSV);肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae, S.pn);嗜肺军团菌(Legionella pneumophila, L.pn);流感嗜血杆菌(Haemophilus infuenzae, H.in);肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae, C.pn);肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, M.pn)。在每个离心管中，作者放置3对目标引物及其对应的Taqman探针和一个内部控制(GAPDH)引物-探针组，这四种探针都标记有不同但常见的荧光基团，能够被实验室常见的qPCR仪检测到。通过优化反应体系，使得方法检测限为250-500 copies/mL(1.25-2.5 copies/反应)，与单重PCR定量范围基本一致;作者也利用167例阳性临床样本证明了方法的临床适用性。

  总的来说，尽管文章在研究方法和内容上并无很大创新，但方法瞄准的检测组包含了最常见的呼吸道病原体，而非以往单一病毒或者致病菌的检测，且检测周期在3 h以内。这样的设计有助于临床开展精准医疗工作，继而减少抗生素的滥用情况。

  原文链接：https://doi.org/10.1038/s41598-022-15543-6