疫苗工厂：干酪乳杆菌表达牛轮状病毒 VP4/VP7，开启犊牛腹泻口服免疫新时代

背景知识

牛轮状病毒（Bovine Rotavirus, BRoV）是引起新生犊牛腹泻的主要病原体之一，导致高发病率与死亡率，给全球畜牧业造成重大经济损失。传统疫苗多为灭活或减毒株，存在免疫效果有限、需冷链保存、接种不便等问题，尤其在激发黏膜免疫方面效果不佳。因此，开发一种安全、高效、易于使用的新型疫苗策略具有重要现实意义。

研究意义

本研究首次在L. casei中成功表达牛轮状病毒VP4和VP7蛋白，展示了一种新型口服黏膜疫苗平台的可行性。该平台具备以下优势：（1）无需冷链保存，适合资源匮乏地区；（2）口服接种，操作简便，动物接受度高；（3）激发局部与系统免疫反应，有望提供更全面的保护；（4）可拓展性强，未来可用于开发多价疫苗或联合其他病原抗原。

研究内容

本研究利用重组DNA技术，将牛轮状病毒的两个主要外壳蛋白基因VP4和VP7克隆至表达载体pNZ2103中，并通过电转化导入Lactobacillus casei（乳酸杆菌）中，构建能稳定表达VP4和VP7蛋白的重组菌株。通过SDS-PAGE和Western blot验证蛋白表达及其抗原性，评估其作为口服疫苗载体的潜力。

实验结果

成功扩增并克隆了VP4（828 bp）和VP7（1032 bp）基因片段；构建的重组L. casei菌株可稳定表达VP4（约27 kDa）和VP7（约37 kDa）蛋白；Western blot分析显示，这些蛋白能被特异性抗轮状病毒抗体识别，表明其抗原性良好；L. casei作为表达宿主，具备胃肠道存活能力和免疫刺激潜力，适合用于口服疫苗开发。

参考来源：

Atalay E, Sözdutmaz İ, Kökkaya S. Development of a recombinant Lactobacillus casei strain expressing Bovine rotavirus VP4 and VP7 proteins as an oral vaccine candidate against calf enteritis. Vet Ital. 2026 May 26;61(3). doi: 10.12834/VetIt.3740.34491.2. PMID: 40574558