蛋鸡疫苗混合免疫新突破：接种少44%，保护率100%

研究背景

当前，家禽（poultry）养殖集约化程度提升，蛋鸡养殖规模扩大，但高产品种蛋鸡疾病抵抗力弱，疫病防控压力剧增）。疫苗接种是防控关键，蛋鸡养殖周期长，灭活疫苗因安全性高成主流，却需逐只注射，频繁接种不仅让蛋鸡应激、影响生产，还增加人力成本与针头污染传病风险。

虽有多价疫苗研发、多部位同时注射等方案，可多价疫苗研发技术复杂、周期长且成本高，多部位注射操作繁、易污染，难适配规模化蛋鸡场。此前猪、牛、羊等有疫苗混合免疫探索，蛋鸡领域却无相关可行性分析与应用研究，急需高效便捷的疫苗免疫新策略，这也是农业微生物应用于畜禽健康的重要方向。

研究方法

研究以农业微生物领域常用的市售蛋鸡灭活疫苗为材料，选用Pulike Bioengineering, Inc.生产的7种油乳剂灭活疫苗（白矿物油为佐剂），如新城疫-禽流感H9亚型二价疫苗（ND-AI H9）、禽流感H5/H7三价疫苗（AIH5/H7）等，分“实验室验证-田间应用”两步开展。

实验室阶段，先将ND-AI H9与AI H5/H7按1:1混合，用激光粒度分析仪（OMEC LS-609）测粒径分布（D10、D50、D97等），室温静置1-7天看悬浮稳定性，鲎试剂法（LAL）测内毒素含量，混合疫苗4℃储存7天后涂胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）查细菌污染；再选60只21日龄SPF鸡，分对照组与3个免疫组（单接ND-AI H9、单接AI H5/H7、接混合疫苗），颈部皮下注射，免疫后14、21、28天采血清，用血凝抑制试验（HI）测新城疫（ND）、禽流感（AI H9、H5、H7）抗体效价。

田间应用阶段，在黄山同乐生态农业有限公司规模化蛋鸡场，选8.9万只海兰褐蛋鸡，参考原免疫程序（120日龄内9次接种），设计优化混合免疫程序（120日龄内5次接种），按比例混合疫苗后颈部皮下或胸部肌肉注射，免疫后38、68、98、138天随机采30份血清，用HI或酶联免疫吸附试验（ELISA）测抗体效价、阳性率及变异系数（CV），分析实际应用效果。

研究结果

混合疫苗理化特性与安全性

混合疫苗（ND-AI H9+AI H5/H7）粒径呈正态分布，D50值0.689μm，介于两种单独疫苗间，粒径微分分布峰值与单独疫苗接近，悬浮液液滴形状更规则；室温静置1-7天无分层（图3），4℃储存7天涂TSA无细菌菌落，内毒素含量0.232-0.237 EU/mL，与单独疫苗无显著差异（P>0.05），且远低于灭活疫苗内毒素质控阈值（50 EU/mL），说明混合疫苗理化稳定、安全达标（Table 4）。

SPF鸡免疫效果

免疫后14、21、28天，接种混合疫苗的SPF鸡，ND、AI H9、AI H5（Re-13、Re-14）、AI H7（Re-4）抗体效价与单接对应疫苗组无显著差异（P>0.05），如免疫28天，混合组ND抗体效价10.10±0.92 log2，单接ND-AI H9组9.40±1.17 log2（P=0.0541）；所有免疫组SPF鸡抗体阳性率均100%，免疫28天无死亡，无不良反应，证明混合免疫不影响疫苗免疫原性与安全性（Table 5）。

规模化蛋鸡场应用效果

优化后混合免疫程序实施，蛋鸡120日龄内接种次数从9次减至5次。免疫38天，ND、AI H9、AI H5（Re-13、Re-14）、AI H7（Re-4）、传染性法氏囊病（IBD）抗体效价均达保护水平，阳性率100%，CV值低于16%；68-138日龄，除鸡毒支原体（MG）68日龄阳性率70%外，其余疾病抗体阳性率超80%，ND、AI H9、AI H5、AI H7等主要疫病抗体效价稳定，CV值多低于20%，且ND、AI、减蛋综合征（EDS-76）抗体水平与原程序相当或更高，表明混合免疫在规模化场景能有效防疫（Table 6、Table 7、Table 8）。

结论与展望

该研究表明，将同类型油乳剂市售蛋鸡灭活疫苗按科学比例混合联合免疫，理论与实践均可行：混合疫苗理化稳定、安全，既能保证与单独疫苗相当的免疫效果（SPF鸡与规模化蛋鸡抗体达标、阳性率高），又能大幅减少接种次数（120日龄内从9次减至5次），缓解蛋鸡应激，降低人力成本与传病风险，为农业微生物技术在畜禽疫病防控的落地提供了可行方案。

从当前农业微生物应用现状看，畜禽疫苗是农业微生物产业重要部分，其应用效率直接影响养殖效益与防疫成效。该研究创新点在于，未依赖复杂疫苗研发技术，而是优化现有商业化疫苗应用方式，解决规模化养殖实操痛点，这种“应用导向”的技术优化，更易在中小养殖场推广，能快速提升行业整体防疫水平。

未来，可基于此研究进一步拓展：一方面，探索更多类型灭活疫苗（如针对传染性支气管炎、禽腺病毒等疾病的疫苗）的混合兼容性，丰富混合免疫方案适用范围；另一方面，结合农业微生物领域佐剂技术创新，研发更适配混合免疫的专用佐剂，提升混合疫苗免疫效果与稳定性。同时，需建立混合疫苗应用标准化操作规范，明确不同疫苗混合比例、储存条件与使用期限，避免非授权混合的安全风险，推动蛋鸡疫苗混合免疫技术向更规范、高效方向发展，为畜禽健康养殖与农业微生物产业升级助力。

参考文献：

WANG L, JIANG L, ZHU T, et al. Feasibility analysis and study on immune effects of combined immunization with mixed inactivated vaccines in chickens [J]. Journal of Applied Poultry Research, 2025, 34: 100580.