无血清无蛋白培养基在哺乳动物细胞培养及传染性法氏囊病病毒（IBDV）高效增殖中的应用

一、 行业痛点与无血清/无蛋白培养升级

传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的一种高度传染性禽类疫病，会导致严重的免疫抑制和高死亡率，对全球家禽养殖业构成巨大威胁。

传统 IBDV 疫苗的生产高度依赖于鸡胚或补充有胎牛血清（FBS）的初代/传代细胞培养。然而，全球每年消耗数十万升胎牛血清，不仅面临严重的动物伦理问题，更存在批次间差异大、成本高昂以及易引入外源病毒等风险。因此，开发不含任何血清和动物蛋白成分的化学限定培养体系，是实现禽用疫苗高安全性与规模化制造的迫切需求。

二、 IGF-I 替代血清策略与细胞生长动力学对比

为消除对血清的依赖，研究人员利用 RPMI 1640 作为基础培养基，仅补充 5 g/mL的重组 IGF-I，对 BHK-21 和 CER 两种哺乳动物细胞系进行了直接驯化。

图1 BHK-21 与 CER 细胞在 RPMI 1640 + IGF-I（a）与传统 MEM + FBS（b）条件下的生长曲线对比

研究结果表明，IGF-I 作为一种关键的生长因子，能够有效提供刺激细胞增殖与存活所需的信号，彻底取代了胎牛血清在细胞附着、铺展和微环境调节中的作用。

三、 经典株、变异株及超强毒株的高效复制与定量分析

为了验证无血清驯化细胞对不同基因型 IBDV 的易感性，研究团队将 Lukert（经典株）、F52/70（变异株）以及 G11（超强毒株）分别接种至 BHK-21 和 CER 细胞中。经过 5 代连续传代适配，两种细胞均展现出优异的毒株适应性。

图2 实时荧光定量 RT-PCR（SYBR Green）定量分析不同毒株在感染后 48 小时（a，无血清）与 24 小时（b，含血清）的病毒 RNA 表达量

病毒滴度表现：三种毒株在无血清/无蛋白培养条件下的最终感染滴度均达到了10^3.75~10^4.50TCID50/100 μL，完全满足疫苗生产的毒力要求。

超强毒株适配：特别是过去极难在传代细胞系中无血清增殖的超强毒株（vvIBDV），在此体系中同样实现了高产，为超强毒株灭活疫苗或减毒活疫苗的研发打破了宿主底物限制。

针对国内高端动物疫苗或人用疫苗的产业化落地，引入如 广东环凯（Huankai） 等专业微生物及细胞培养基质供应商的高标准产品能够有效提升工艺稳定性。通过利用环凯提供的高质量、组分明确的无血清培养基干粉及核心原料，疫苗企业可以精准调控反应器中的葡萄糖和特定氨基酸浓度，确保规模化微载体悬浮培养批次间的极高重现性，从而稳步推进高品质、低成本细胞培养狂犬疫苗的商业化量产进程。

参考文献：

Tapparo, A. F., Tonietti, P. O., Luvizotto, M. C. R., & Cardoso, T. C. (2008). Application of a Serum/Protein-Free Medium for the Growth of Mammalian Cell Lines and High Level Production of Classical, Variant and Very Virulent Strain of Infectious Bursal Disease Virus (IBDV). American Journal of Agricultural and Biological Sciences, 3(2), 517-521.