PCV2d 病毒样颗粒疫苗研发成功，攻毒仔猪实现完全保护

发表于 2026 年《Microbial Pathogenesis》研究针对当前主流 PCV2a 商品化疫苗对流行 PCV2d 保护不足的行业痛点，利用印度本土 PCV2d 分离株的衣壳 ORF2 基因，借助杆状病毒‑昆虫细胞系统开发出病毒样颗粒（VLP）候选疫苗，在仔猪动物试验中展现出良好稳定性、强体液与细胞免疫应答，同源攻毒后实现完全保护，为 PCV2d 相关猪圆环病毒病防控提供新的本土疫苗方案。

猪圆环病毒 2d（PCV2d）是当前全球占主导地位的基因型，是猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）的主要致病原，会造成猪只生长迟缓、淋巴损伤、继发多种病原混合感染，给养猪业带来巨大经济损失。市面上现有商品化圆环疫苗大多基于 PCV2a 基因型，由于基因型之间氨基酸差异较大，对流行的 PCV2d 毒株交叉保护有限常出现免疫失败。印度猪场 PCV2d 流行率高，但国内尚无对应疫苗且进口疫苗成本高昂，亟需开发适配本土流行毒株的新型疫苗。病毒样颗粒 VLP 不含病毒核酸，安全性高，保留完整抗原表位，是圆环疫苗理想研发方向。

研究团队选取印度 PCV2d 野毒株 ORF2 衣壳基因，经过密码子优化后构建重组杆状病毒，选用 Sf9 细胞扩增重组病毒，Tnao38 昆虫细胞用来高效表达衣壳蛋白。表达后的衣壳蛋白可以自主组装成 17‑20 nm 的空病毒样颗粒，经过蔗糖密度梯度超速离心完成纯化，透射电镜观察确认 VLP 组装完整。科研人员对纯化后的 VLP 开展稳定性评价，该候选 VLP 在 4℃条件下稳定性优异，37℃可短期稳定；45℃处理超过 6 小时会发生结构破坏，50℃条件下颗粒完全降解；pH7.5 中性环境结构稳定，偏酸性环境会造成 VLP 结构解体，提示疫苗储存和使用需要规避酸性条件与高温环境。

动物试验分为免疫原性试验和攻毒保护试验两部分。首先使用 3 周龄 PCV2 阴性杂交仔猪，分为空白对照组、不加佐剂 VLP 组、添加 Montanide™ ISA 206 VG 佐剂的 VLP 免疫组，肌肉进行免疫。同时设置两种加强免疫方案，一组首免后 30 天进行加强，另一组首免后 90 天延迟加强用来观察免疫程序对抗体持续时间的影响。试验定期采集血液样本，检测 IgM、IgG 抗体滴度同时分离外周血单核细胞检测 IL‑2、IL‑4、IL‑12、IL‑6、IFN‑γ 等细胞因子水平。

结果显示添加佐剂的疫苗组诱导免疫效果显著优于无佐剂组别，免疫后 7 天即可检测到明显 IgM 应答，14 天后 IgG 抗体水平快速升高。对比两种加强程序，首免后 90 天延迟加强方案可以诱导出更持久的 IgG 抗体，抗体高滴度维持时间显著优于 30 天早期加强。细胞因子检测证实该 VLP 疫苗可以同时激活 Th1 和 Th2 通路，产生平衡的体液免疫和细胞免疫应答且IFN‑γ 分泌水平显著提升，有利于清除病毒。

后续攻毒试验选用 3 周龄 PCV2 阴性大白约克夏仔猪，免疫组采用 0 天、14 天两针佐剂 VLP 疫苗，对照组不免疫。二免后 28 天通过鼻腔途径接种同源 PCV2d 强毒分离株进行攻毒，持续观察临床症状、体温、体重，采集鼻拭子、肛拭子，攻毒 28 天后全部剖检采集肺、淋巴结、脾脏、肝肾等组织，开展病毒核酸定量、组织病理切片评估。

攻毒之后，未免疫对照组仔猪出现高烧、腹泻等典型圆环临床症状，体重增长显著受阻；鼻肛拭子以及多个脏器组织均检出 PCV2d 病毒核酸，病理可见严重间质性肺炎、淋巴滤泡坏死、淋巴细胞耗竭且肝肾心脏多器官出现特征性损伤。而 VLP 疫苗免疫组仔猪全程无发烧、腹泻等临床发病表现，生长状态正常；拭子和全部脏器样本均未检出 PCV2d 病毒 DNA，组织切片没有观察到圆环病毒相关的特征病理损伤，实现同源强毒攻毒下的完全保护同时血清中和抗体还可以对 PCV2b 产生交叉中和效果。

研究人员总结，基于本土 PCV2d 毒株 ORF2 基因构建的 VLP 候选疫苗，热稳定性满足常规疫苗储运需求，搭配水包油佐剂之后可诱导高水平中和抗体与平衡细胞免疫；延迟加强免疫策略能够延长抗体存续时间；同源 PCV2d 攻毒后疫苗可以阻止病毒复制、排毒，完全避免临床发病和组织病理损伤。该疫苗已经提交印度专利申请，但本试验动物样本数量有限，后续还需要开展田间大规模试验、免疫持续期、母源抗体干扰等研究，进一步验证产品的田间应用潜力。

来源：10.1016/j.micpath.2026.108748