多糖因多样性和生物活性受到越来越多的关注。胞外多糖(EPS)在细菌、真菌和微藻等微生物的细胞生长过程中会主动产生并释放到周围环境中。EPS可保护微生物免受极端环境(如干旱、高温和紫外线辐射)的影响，抑制溶菌酶，储存营养，并增强对有毒重金属的耐受性。作为重要的天然产品之一，EPS具有许多优点，不仅提取方便，而且成本低、无毒、生态友好，不受季节和地理条件(如植物病虫害)的影响。

  酵母EPS是微生物EPS的一种，具有潜在的抗氧化、抗凝血、抗血栓和抗病毒等多种生理活性，可用于生产生物免疫调节剂，具有广阔的市场前景。迄今为止，已有报道称多个酵母菌种(隐球菌属、汉森氏菌属、脂肪霉属、大疱菌属、金黄色葡萄球菌属、芽孢杆菌属和红酵母属)可产生EPS。作者从R. mucilaginosa CICC33013中分离并鉴定了水溶性外多糖REPS2-A(图1)。REPS2-A由半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和甘露糖组成，摩尔比分别为63.1: 0.2: 18.3: 18.3，分子量为7.125×106 Da(图2)。根据傅立叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)和甲基化分析(图3-5)，REPS2-A被确定为一种高度支化的多糖，其骨架为(1→3)连接的半乳糖(Gal)，末端为甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖(Man、Gal和Ara)。经鉴定，这些分支分别为(1→2)连接的葡萄糖(Glc)、(1→4)连接的Man、(1→3)连接的Glc、(1→4,6)连接的Man和(1→2,3,4)连接的Ara。此外，REPS2-A还具有出色的清除自由基(DPPH、ABTS和还原力)和抗肿瘤活性(图6)，且其对人肝癌细胞HepG2的生长有抑制作用，其IC50值为1.0mg/mL，而对正常人肝细胞L02的细胞毒性作用较弱，机制研究表明REPS2-A可诱导细胞周期停滞在G1/S期，且与剂量和时间有关(图7-9)。REPS2-A可从液体中快速生产和收集。考虑到其药用价值和经济价值，利用液体培养发酵技术生产EPS具有很大的潜力，可用作治疗药物。

  图1 Cellulose DEAE-52色谱柱上REPS(a)和Sepharose CL-6B色谱柱上REPS2(b)的色谱层析

  图2 单糖标准品(a)和REPS2-A单糖成分(b)的离子色谱(ICS)图谱

  图3 REPS2-A的傅立叶变换红外光谱

  图4 REPS2-A 部分甲基化醛糖醇乙酸酯的TIC色谱图

  图5 多糖REPS2-A的核磁共振波谱

  图6 抗坏血酸(Vc)、REPS2和REPS2-A清除自由基和还原力的活性

  图7 用不同浓度的REPS2-A处理HepG2细胞24h后的周期分析

  图8不同浓度胞外多糖REPS2-A处理后HepG2的细胞形态

  图9 未经处理和经1mg/mL多糖处理24、48和72h的HepG2细胞的凋亡率