诺如病毒在唾液细胞系中的复制:研究人类肠道病毒的新方法
诺如病毒在唾液细胞系中的复制:研究人类肠道病毒的新方法
诺如病毒是导致全球急性胃肠炎的主要病原体之一,尤其在免疫功能低下的人群中可引发严重疾病,显著增加发病率和死亡率。传统上,诺如病毒的体外培养因缺乏合适的细胞模型而面临挑战,限制了对其复制机制和干预措施的研究。最新研究探索了利用唾液细胞系作为潜在培养平台,以研究实验室来源、粪便和废水中诺如病毒的复制特性,为病毒学研究和公共卫生防控提供新视角。
研究方法
本篇研究首先对实验室来源和粪便来源的肠道病毒在唾液细胞NS-SV-TT-AC中培养观察其不同来源下不同类型病毒的复制特征,最后评估唾液细胞作为单一和多个混合感染(模拟废水中多重病毒感染)平台的可行性。
腺病毒随时间的复制
将AdV41用于感染NS-SV-TT-AC 唾液细胞,并在感染后的不同时间点(pi)浓度(图1)。在4dpi时感染的浓度达到峰值。
图 1 腺病毒41(AdV41)在NS-SV-TT-AC唾液细胞中的时间依赖性复制。源自参考文献
唾液细胞中各种病毒的平均对数增加
在NS-SV-TT-AC唾液细胞中测试了多种病毒的病毒感染性(表 1)。实验室来源的CVB1的复制率最高,平均值为 5.11 log10RNA 浓度增加,其次是CVB3,为4.61log10RNA浓度增加。在粪便来源的病毒中,AdV41显示最高的复制产量(p < 0.001),为1.66log10DNA增加,其次是 Sapovirus V。
表 1本研究中测试的各种病毒的平均对数增加。源自参考文献
实验室和粪便来源的病毒单一感染和混合感染
在实验室病毒感染中,AdV41和HAV单次感染和混合感染之间的拷贝数存在显著差异,而RV 和 AstV没有显著差异(图2a)在粪便来源的样本中AdV41和Sapovirus V单次感染和混合感染之间的拷贝数存在显著差异,而NoV GI和NoV GII均没有显著差异(图2b)
图 2 单次感染与多次混合感染 4 dpi 期间 NS-SV-TT-AC 病毒复制的比较。源自参考文献
废水中病毒复制
在通过dPCR分析的14个废水样本中,3个样本(21%)对所有5种胃肠炎病毒的共同检测呈阳性。在废水样品中发现的病毒混合物是:一个样品缺乏 AdV41,5 个样品的 RV、sapovirus V 和 AstV 阴性,两个样品分别不含 NoV GII 和 GI 或 sapovirus IV。用 14 个浓缩废水样品中的每一种感染 NS-SV-TT-AC 细胞(图3)。样品9显示多种病毒的最高复制率:AdV41(2.74)、NoV GI(2.47)、NoV GII(2.20)和sapovirus V(2.05)。其他样本表现出可变的病毒特异性复制,其中一些样本显示适度增加(例如,样本 10 中的 NoV GII 为 2.57),而其他样本则显示某些病毒的复制量较低或没有可检测的复制。研究表明,肠道病毒从废水样品中成功复制,但是,并非所有样品都支持病毒复制。
图 3 废水中病毒复制变化。源自参考文献
参考文献:Replication of human enteric viruses from wastewater in saliva cell lines
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