15分钟锁定牛奶中的大肠杆菌!新型噬菌体传感器实现超快速检测
食品安全检测领域迎来新突破。近日,波兰科学院物理化学研究所研究团队在国际分析化学期刊《Talanta》发表最新研究,开发出一种基于电场定向噬菌体固定技术的新型电化学生物传感器,可在15分钟内完成牛奶中大肠杆菌(Escherichia coli)的快速检测,无需传统培养富集步骤,在真实乳制品样品中实现12 CFU/mL的检测限,为食品安全现场检测提供了新的技术方案。
食品安全检测为何需要更快?
食源性致病菌一直是全球食品安全的重要威胁。其中,大肠杆菌作为乳制品、肉制品及新鲜果蔬中最常见的污染菌之一,能够引发严重的食品安全事件。传统培养法通常需要24~72小时才能获得结果,而PCR、ELISA等检测技术虽然灵敏,但仍依赖实验室设备和专业人员,难以满足现场快速检测需求。随着食品供应链不断延长和冷链物流快速发展,行业越来越需要一种能够实现快速、灵敏、低成本、现场检测的新技术。
电场"摆正"噬菌体,让细菌更容易被抓住
这项研究最大的创新,在于利用交流电场帮助噬菌体完成定向排列。研究团队首先对氧化铟锡(ITO)电极进行化学修饰,再利用T4噬菌体天然具有的偶极特性,在固定过程中施加交流电场,使噬菌体以"头朝下、尾朝上"的方式排列在电极表面。这种排列方式能够让负责识别细菌的尾纤维充分暴露,大幅提升细菌捕获效率,避免传统随机固定方式中大量识别位点被遮挡的问题。实验结果显示,经过电场定向排列后,传感器检测信号相比普通随机固定方式提高约3倍,相比未固定噬菌体的电极提升约10倍,显著增强了检测灵敏度。
图1 面向噬菌体的ITO生物传感器概述[1]
15分钟完成检测,最低可检测12 CFU/mL
研究人员采用差分脉冲伏安法(DPV)读取检测信号。当细菌被噬菌体捕获后,会阻碍电子传递,从而导致电流下降,通过电流变化即可实现细菌定量分析。在PBS缓冲体系中,该传感器能够实现10~10⁷ CFU/mL范围内的大肠杆菌定量检测,检测限达到62 CFU/mL,整个检测过程仅需约15分钟。更值得关注的是,在未经稀释的脱脂牛奶样品中,该平台依然保持优异性能,检测限进一步降低至12 CFU/mL,且无需样品预富集,为乳制品快速检测提供了新的解决方案。
不仅灵敏,更具有高特异性和稳定性
除了灵敏度,该传感器还表现出良好的专一识别能力。
研究团队以金黄色葡萄球菌作为非靶标菌进行测试,结果显示,相同浓度条件下,对大肠杆菌产生的检测信号最高可达非靶菌的近30倍,有效降低了误检风险。与此同时,该传感器在4℃保存两周后仍保持良好的检测能力,重复性相对标准偏差约为3%~4%,证明其具有较好的稳定性,满足实际应用需求。
微流控设计进一步提升检测效率
为了进一步缩短检测时间,研究团队还构建了循环流动检测系统。通过微流控循环,仅需1 mL样品,约1分钟循环即可获得接近传统15分钟静态检测的检测效果,不仅减少了样品消耗,也为未来在线连续监测提供了新的技术思路。
未来有望拓展至更多食源性致病菌检测
研究人员指出,该平台具有良好的可扩展性。由于不同噬菌体能够特异性识别不同细菌,只需更换噬菌体种类,未来便可扩展至沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌等多种食源性致病菌检测,并有望应用于食品加工、乳制品质量控制、环境监测以及现场即时检测(POCT)等多个场景。总体来看,这项研究通过创新性的电场定向噬菌体固定策略,成功提升了噬菌体生物传感器的捕获效率和检测性能,为构建高灵敏、快速、低成本的食品安全检测平台提供了新的技术路线,也为未来智能化食品安全监测的发展奠定了基础。
参考文献
[1] Ochirbat E, Dolinska J, Gizyński K, Rudko K, Nikiforow K, Opałło M, Paczesny J. Rapid electrochemical detection of Escherichia coli in milk using an oriented phage-based biosensor. Talanta. 2026, 308:129926.
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