大鼠戊型肝炎病毒粪口感染模型的建立及抗病毒研究验证

　　戊型肝炎病毒(HEV)是全球急性病毒性肝炎的主要原因。该病毒主要通过食用受污染的水或食品通过粪口途径传播。大鼠戊型肝炎病毒(大鼠HEV; Rocahepevirus ratti物种)已在几个国家从野生大鼠中分离出来。虽然这种病毒最初被认为只感染老鼠，但最近很明显，这种病毒能够通过感染人类来跨越物种屏障。为了帮助制定治疗和预防策略，需要在小型实验动物中建立方便的戊型肝炎病毒感染模型。2023年发表在《Antiviral Research》上的《Establishment of a robust rat hepatitis E virus fecal-oral infection model and validation for antiviral studies》一文旨在开发并标准化大鼠戊型肝炎病毒感染模型，验证该模型在抗病毒研究中的使用并评估利巴韦林 (RBV) 阻断大鼠 HEV 传播的能力。

　　将人肝癌 (Huh7) 和人结直肠腺癌细胞 (Caco-2) 细胞接种于粪便悬浮液中的大鼠 HEV 毒株 LA-B350 的稀释病毒储备液中，Huh7 和 Caco-2 细胞上清液中的病毒 RNA 水平随着时间的推移而增加，大鼠 HEV 在 Huh7 细胞中复制到更高水平。

　　图1无胸腺裸鼠粪口HEV传播的表征。

　　为了进一步标准化并因此减少传播模型中幼稚大鼠不规则摄取传染性粪便引起的病毒复制变异性，幼稚大鼠口服两次含有预定义病毒RNA拷贝的粪便悬浮液。在这种粪口感染模型中，所有大鼠大约在同一天粪便中的大鼠 HEV RNA 呈阳性(图2B)，肠道和脾脏来源的大鼠HEV具有传染性，因为这些样本可以感染Huh7细胞，从第5天开始逐渐增加病毒RNA水平证明了这一点(图2D)。在感染肠道和脾源性大鼠 HEV 的 Huh7 细胞中，第 14 天 pi 大鼠 HEV ORF2 抗原的表达证实了肠道和脾脏中存在(感染性)病毒(图2E)

　　图2 粪口大鼠HEV感染模型的标准化。

　　为了验证我们的标准化粪口感染模型，我们评估了该模型中RBV的抗病毒活性(图3A)。在治疗结束时，两组的粪便中病毒RNA水平均检测不到(图3B和C)。停止治疗后，载体处理大鼠粪便和肝脏中的病毒RNA载量进一步增加(图3B，D)。与载体处理的大鼠相比，RBV处理的大鼠肝脏中HEV ORF2的表达明显降低，证实了RBV处理大鼠第30天肝脏中的病毒载量较低(图3E)。

　　图3 利巴韦林对通过粪口感染大鼠HEV感染大鼠的影响。

　　综上所述，该文章建立了一个强大的HEV感染模型，该模型非常适合评估(新型)抗病毒分子对粪口HEV感染的疗效。通过使用标签外药物利巴韦林来证明该模型的适用性，该药物降低了粪口HEV感染大鼠组织中的病毒载量。此外，该模型现在还可以用于研究戊型肝炎病毒感染的发病机制，例如研究病毒如何从肠道传播到肝脏，而迄今为止，戊型肝炎病毒仍然难以捉摸。

　　参考文献：

　　Zhang X, Cremers N, Hendrickx S, et al. Establishment of a robust rat hepatitis E virus fecal-oral infection model and validation for antiviral studies. Antiviral Res. 2023;216:105670.