副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一种广泛存在于水产品和水环境中的食源性病原菌，能够引起从轻微的胃肠炎到严重的痢疾等一系列胃肠道疾病。传统的检测方法如培养基法和PCR法虽然准确，但存在耗时长、操作复杂等缺点。因此，开发一种快速、灵敏且特异性强的检测技术具有重要意义。

噬菌体是一种专门感染细菌的病毒，具有高度的特异性和安全性，能够选择性地识别、捕获和裂解目标细菌。金纳米颗粒（AuNPs）具有良好的生物相容性和独特的物理化学性质，能够通过颜色变化实现对目标分析物的可视化检测。将噬菌体与金纳米颗粒结合，有望实现对副溶血性弧菌的快速检测。华中农业大学Xiaohong Wang研究团队成功开发了一种基于金纳米颗粒与噬菌体结合的比色法检测副溶血性弧菌的方法。该方法具有快速、灵敏、特异性强等优点，能够在复杂的食物和环境样品中实现对病原菌的有效检测，具有广阔的应用前景。

研究方法

该研究中，首先从鲍鱼样本中分离并鉴定了一种裂解性噬菌体VPP1，其基因组为42,445 bp的DNA，包含64个开放阅读框（ORFs），不含致病基因或耐药基因。基于VPP1的特异性，建立了一种金纳米颗粒与噬菌体结合的比色法检测副溶血性弧菌的方法（AuNPs@VPP1）。该方法通过噬菌体VPP1介导的金纳米颗粒聚集，实现对目标细菌的快速检测。

实验过程

噬菌体的分离与鉴定：从鲍鱼样本中分离噬菌体VPP1，并通过透射电子显微镜观察其形态特征，确定其为Caudoviricetes类噬菌体；金纳米颗粒的制备：采用柠檬酸还原法合成金纳米颗粒，其粒径约为15 nm，表面带负电荷，具有良好的分散性；检测方法的建立与优化：通过调整pH值、噬菌体添加量和孵育时间等条件，优化AuNPs@VPP1的制备条件。在最佳条件下，金纳米颗粒与噬菌体结合后，能够有效捕获目标细菌，并通过颜色变化实现可视化检测。

结果与分析

检测灵敏度与特异性：该方法能够在8.9 × 10¹至8.9 × 10⁸ CFU/mL的范围内检测副溶血性弧菌，且不与干扰菌或死菌发生交叉反应，基于AuNPs@VPP1比色法的特异性和灵敏性结果如下图所示；样品检测效果：在模拟污染的湖水和小龙虾样品中，该方法的回收率分别为81.07%–129.17%和83.78%–129.73%，在自然污染样品中也表现出良好的检测效果，回收率在90.60%至114.86%之间。

图片来源：Journal of Agriculture and Food Research

未来的研究可以进一步开发噬菌体混合物，扩大检测范围，或对噬菌体进行工程改造，提高其宿主特异性。此外，该检测框架还可以应用于其他食源性病原菌的检测，为食品安全和公共卫生提供有力的技术支持。

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.jafr.2024.101571