新型检测法助力盐渍贝类甲肝病毒检测

　　在全球食品安全的严峻形势下，甲肝病毒(HAV)引发的食源性疾病犹如高悬的达摩克利斯之剑，时刻威胁着公众健康。据世界卫生组织统计，2016年全球就有7134人因HAV离世，其危害不容小觑。在各类食品中，贝类因易受污染且传播风险高，成为防控重点。尤其在国际贸易频繁的当下，进口盐渍贝类的安全问题愈发凸显，如韩国曾因咸蛤蜊受HAV污染，引发贸易风波与健康担忧。在此背景下，精准、高效的HAV检测方法成为保障食品安全的关键。

　　传统检测方法的困境

　　一直以来，ISO 15216–2:2019作为食品中HAV检测的通用标准，在实际应用于盐渍贝类检测时却力不从心。盐渍贝类中高浓度的NaCl及复杂成分，如同重重障碍，严重干扰检测过程。在对该标准方法(ISM)及改良的PEG方法(MPM)的研究中发现，它们在处理盐渍贝类样本时，病毒回收率极低，检测灵敏度也差强人意，难以满足准确检测的需求，这迫切呼唤新检测方法的诞生。

　　近期，一项发表于《LWT - Food Science and Technology》的研究，作者明确指出ISO 15216-2:2019 ISM和MPM在盐渍食品基质和低病毒含量条件下，回收率和检测灵敏度低的问题。设定了开发更有效提取和浓缩方法以检测盐渍贝类中HAV的目标，旨在提高检测的灵敏度和准确性，确保食品安全。

　　研究方法

　　作者设计并对比了四种HAV提取和浓缩方法，分别为ISM、MPM、改良脱盐法(MDM)和改良脱盐与PEG法(MDPM)，具体如下：

　　ISM：采用传统的病毒提取和浓缩流程，使用标准的处理程序。

　　MPM：在ISM的基础上，增加了PEG沉淀步骤，以提高病毒的浓缩效率。

　　MDM：首先通过去盐处理样本，然后进行病毒提取。

　　MDPM：结合去盐和PEG沉淀步骤，旨在最大化病毒的回收率和灵敏度。

　　图1 比较了四种方法(标准ISO方法:ISM、PEG改进方法:MPM、脱盐修饰法:MDM和脱盐-聚乙二醇修饰法:MDPM)对盐渍贝类甲壳病毒的提取和浓缩过程。

　　新型检测方法的优势彰显

　　实验结果令人振奋。在回收率方面，MDPM表现卓越，10倍稀释和未稀释样本RNA的回收率分别达2.38%和0.38%，远超MDM的0.141%和0.00%。抑制指数上，MDPM同样优势明显，在10倍稀释RNA时，MDM和MDPM的PCR抑制分别为0.638和0.684.远低于ISM和MPM，表明其能有效去除PCR抑制物，提升检测准确性。

　　图2 两种优势方法(MDM和MDPM)的回收率

　　图3 两种较优方法(MDM和IDPM)的抑制指数

　　灵敏度检测中，MDPM可检测到HAV滴度为，而MDM在此浓度下无法检测，凸显MDPM灵敏度优势。在商业样本检测中，MDPM检测出的HAV阳性样本率为5.9%，是MDM(1.9%)的三倍之多，进一步证实其在实际检测中的可靠性。

　　表1 采用两种方法(MDM、MDPM)对盐渍贝类样品中甲肝病毒进行定量检测

　　优点与创新

　　该论文提出了两种新颖的HAV提取和浓缩方法(MDM和MDPM)，显著提高了在盐水贝类中检测HAV的灵敏度和回收率。

　　通过结合脱盐和PEG沉淀的方法，MDPM在提高HAV检测的准确性和速度方面表现优越，适用于常规检测。

　　研究结果显示MDPM方法在盐水贝类样本中检测到的HAV阳性率显著高于传统方法，具有重要的公共卫生意义。

　　新型检测方法的意义深远

　　MDPM方法的成功研发意义重大。它大幅提高了盐渍贝类中HAV的检测效率，有效降低了假阴性风险，为食品安全监管提供了强有力的技术支撑。在国际贸易中，有助于严格把控进口盐渍贝类质量，防范HAV流入市场。未来，研究人员计划开展多实验室联合研究，进一步验证和完善该方法，并探索其在其他盐渍食品检测中的应用潜力，有望在全球食品安全保障领域掀起新的变革，守护公众健康。

　　参考文献：

　　Wang D, Ma L, Luo B, et al. The extraction and concentration methods by desalination and PEG for hepatitis a virus detection in salted shellfish[J]. LWT, 2024. 198: 116013.